如何保持干细胞培养过程中不分化

jiangyinshen

子宫内膜干细胞，从公司买回来已经传到第四代了，如何保证它不分化成别的细胞呢，单凭细胞形态观察可以吗？
( F$ C3 J% ?2 R( O又怎样鉴定它有没有分化呢？请各位高手指教，谢谢！

jenvy121

建议楼主查找此干细胞的特异性表达的表面抗原，进行流式检测其分化程度，如是纯粹的干细胞应无其它杂细胞，另外培养过程中不知你使用何种培养基，应该采用无血清培养基进行培养，血清会加速干细胞的分化

jiangyinshen

jenvy121 发表于 2012-11-8 14:21
7 s! C- m" }: @8 t  h建议楼主查找此干细胞的特异性表达的表面抗原，进行流式检测其分化程度，如是纯粹的干细胞应无其它杂细胞， ...

/ b5 ~9 \" s* @3 ^9 z7 k
应该是纯粹的干细胞，没有杂细胞的# ]+ s% `6 n% p
我想请教的是如果用无血清培养基培养，细胞的营养物质从何而来呢？: l) ^; \1 {% q0 i; N2 E
请赐教，谢谢！

呼吸

回复 jiangyinshen 的帖子8 }$ m8 ^' T! z4 l3 ]6 Y6 S

, {' _$ S3 M0 Y, S/ Y/ ?5 M可以用血清替代品的啊

jiangyinshen

呼吸 发表于 2012-11-8 18:19 * i4 R7 _) S5 u- H3 O, ^* U) g
回复 jiangyinshen 的帖子/ V! K! j1 [( s4 j

/ G; V# ^  K0 a- s4 k5 ^$ O1 ]" c可以用血清替代品的啊

2 X% l  ?6 D( ^& T
我的培养液是随着干细胞一起买过来的，我估计公司在配制培养液的时候应该考虑了防止干细胞分化的问题吧

jenvy121

回复 jiangyinshen 的帖子3 W. o, l( J- S$ {
. [' ]/ g  k1 |9 P3 G
无血清培养基成分中会添加一些白蛋白，也就是所谓的血清替代物来维持细胞的生长，另外无血清培养基的基质培养基也是我们常用的1640，DMEM等，基本的氨基酸，蛋白质，碳水化合物都有了，只不过还会添加其它的更有效的成分，实现细胞的存活和定向生长，这一点楼主大可放心

jiangyinshen

jenvy121 发表于 2012-11-14 08:50
2 H2 a! ]# P3 B回复 jiangyinshen 的帖子
; q7 d6 J/ ^. C
2 |) ?' y0 i/ a8 |无血清培养基成分中会添加一些白蛋白，也就是所谓的血清替代物来维持细胞的生长 ...

9 @3 n+ L& I* H3 Y- @& T. T: j
领会了，非常感谢！