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SKC-SFC

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楼主

发表于 2012-11-1 16:38 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印

近期在干细胞染色体核型分析前，在制备染色体的时候遇到以下情况： n c1 Y( A4 z5 R( |
1 .不知道怎么选取细胞，过早则看不到任何染色体形成，太迟形态也不对
2 .最大的问题在于低渗处理的时候，没有办法破膜。; D7 r; `3 K2 X
求助：1.如果选择用于制备染色体的细胞5 E5 D0 w, b/ N( v" C* F6 P' _2 Z
2细胞低渗处理方法如何优化？# k9 G9 x, h" H
谢谢各位i！

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沙发

发表于 2012-11-1 20:39 |显示全部帖子

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藤椅

发表于 2012-11-2 14:30 |显示全部帖子

回复 xbs530515 的帖子# Z/ I* z. C! [. U7 O
0 I9 N, @: K: T: p0 u
嗯，说得有道理，第一次有40%的细胞是可以看到分散的染色体，形态也很典型，固定和染色都不错。但第二次的实验结果失败，选取的细胞是36小时的细胞，低渗和固定后看到的细胞里看不到染色体的存在，低渗的话应该只是胀大，并不需要细胞膜破掉，我用的是KCl0.075M，作用时间为30min，秋水仙素的使用浓度为终浓度0.45ug/mL。