吸取单个核细胞时（也就是吸取灰白色细胞层）的问题

突击兵之小土豆

    书上说吸取灰白色细胞层时，沿管壁吸取，但是实际操作时发现，在管壁的边缘有一圈细胞絮状物，有颜色，如果吸取的话，离心后，细胞中混有的血小板和红细胞很多，如果不吸的话，离心后的细胞数量少，但是够白，怎么办？大家都是怎么处理的

vanessa

我们作为临床用的细胞，一般是沿壁吸的，吸取少量红细胞和血小板是没有关系的，因为它们会在后续的传代过程中被稀释。如果做科研用，可以沿中间吸，剩余少量淋巴细胞就不要了。

shy8610

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& D4 p4 ]2 Y- d4 X: P. F; J回复 突击兵之小土豆 的帖子/ Z% ~: L7 |! k% a7 Y4 K" s# t; a) x
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我无法回消息，留言，只有回帖的权限

突击兵之小土豆

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呵呵  加你好友了  

shy8610

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- d0 E4 w, G4 m: @/ U* U; z本来想加你为好友的，可惜啊，刚入门权限不够，无法操作

突击兵之小土豆

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" w* x5 s1 I7 m5 D强悍啊，谢谢分享经验

shy8610

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, X9 \: _( {3 C4 Y7 W# T8 y( d: V1 v不好意思，再补充一下，等自己熟练了，你完全可能用电枪带着10ml的移液管吸，呵呵，我现在就这么干的，不影响效率，我们一般样本半夜到，通宵分血，一分就是40-60份啊，时间效率么问题，但言归正传，如果没把握，宁愿慢点，这是最重要的一步，对吧，关系到PBMC的得率

shy8610

回复 突击兵之小土豆 的帖子1 ~- h  W& b6 {2 z1 e, e0 r1 ~, n0 P
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土豆哥，你好，很高兴与你讨论，我知道我的文字表述能力有限， 是这样的，我们分PBMC是2种，1种是200ML健康人，1种是40ML病人的,一般先除去血浆，剩25ml的固体物，用无菌pbs调整到35ml左右，充分混匀，缓慢小心铺在15ml的fercoll上，形成明显分层，离心后，如果血液状态好的，是可以十分清晰看到白膜层，比较扁，我们用巴氏管就直接伸到白膜层，吸得控制，尽量多吸白膜层，可能适量混入上清，不可混入fercoll,为什么我说要边吸边上走。然后练手的事情嘛，我刚开始做的时候，吸不好白膜，就抽自己的血练，当然这个看个人，也可以拿实验样本练，看条件咯

突击兵之小土豆

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哦  知道了  不过我还是喜欢用360浏览器 这个有时也能用 像今天就可以 呵呵

细胞海洋

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看17楼