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楼主: l19rna
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[请教] 荧光原位杂交(fish)探针设计原则和方法     [复制链接]

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包包
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发表于 2013-1-12 12:41 |只看该作者
谢谢大家,这两天忙考试了,没上网,非常感谢

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发表于 2013-1-18 16:06 |只看该作者
我也要做胚胎的RNA FISH ,想请教一下protocol呀!谢谢

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发表于 2013-1-18 20:40 |只看该作者
回复 hn1022 的帖子. {- J/ z6 [3 V, K

& A% {# ^8 @  A$ h; C: W* M' V不同天数的胚胎的ptotocol会有细节上的差别,我做的比较早期,建议参考nature protocol上的文章: 3 m/ e. q5 p' x% G- W' y2 ]& w
Title:An optimized procedure for whole-mount in situ hybridization on mouse embryos and embryoid bodies
- r8 ^; o- b1 |2 c0 T) a5 ]
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发表于 2013-6-26 15:02 |只看该作者
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发表于 2013-6-26 15:03 |只看该作者
想了解

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发表于 2013-8-6 00:58 |只看该作者
做ISH,最常用的还是Riboprobe吧?我想FISH也应该是这样的。我最近要做ISH,探针的话想找个公司来做。
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发表于 2013-8-6 14:21 |只看该作者
我想请教一下想做一个对照内参探针找什么基因比较好 本人刚接触ish
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发表于 2013-8-6 23:47 |只看该作者
回复 doctorrobin 的帖子$ I1 {0 j7 |9 F3 \! x

/ c+ z2 t9 [2 u" N建议你发新帖提问

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发表于 2013-8-7 07:43 |只看该作者
回复 doctorrobin 的帖子/ ~4 {  i6 s& n+ V# C0 ~+ V
' [6 J9 g% \5 ?# `: ~; X( |
我一般是用别人已经发表的探针,而且其表达谱是公认的,才用来做阳性对照;+ y. q$ ]$ _, A# z( f- y! ]1 Q
阴性对照就选择cRNA的互补序列,这个在你的cRNA载体上转录出来就行。
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发表于 2013-8-7 07:47 |只看该作者
回复 icebaby 的帖子
9 ?3 U4 a& ?/ Q8 W/ A& D: ?3 u# U6 J7 P6 v. g
FISH已经有很多更高效的方法。尤其是做单细胞且定量的FISH。其探针也有很多种,除了传统的,还有50bp长度,19-24bp长度探针,等等
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