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b. 诱导多能干细胞传代
: j+ s" \8 Q8 u5 D* e( v5 R取60-mm培养皿 每个加入3 ml 0.1%明胶溶液,37℃包被30分钟以上。
! d) b- m! B$ d" ^" e2 _2 {+ ?吸掉培养基,加入PBS清洗一遍,每个60-mm培养皿中加入1 ml 0.25% Trypsin,37℃孵育2分钟。9 b. A* o% c' j# F% P7 B
加入2 ml DMEM 培养基,用1 ml 枪头轻轻吹打3次,将细胞悬液转移至15-ml 离心管,1200 rpm离心5分钟。) P0 u, j* h, W* [
吸掉上清,用4 ml KOSR-DMEM培养基重悬,转移至明胶包被的60-mm培养皿,37℃,5% CO2培养,让滋养层贴壁40分钟。
# J( z& A Y$ o- q9 d* n将60-mm培养皿中细胞上清转移至15-ml 离心管,1200 rpm离心5分钟。
2 X6 ?" c$ d# `1 P C6 s吸掉培养基,用4 ml KOSR-DMEM培养基重悬,按照1:4的比例分至3个铺有滋养层细胞的60-mm培养皿,37℃,5% CO2培养。
% J$ P: L6 \$ }& O5 Z/ q8 g9 p将就一下吧,我本科的时候写的,基本都对 |
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