关于细胞消化的相关实验操作

突击兵之小土豆

最近做实验，在细胞消化的过程中，发现自己对于其机理和反应的相关条件不是很清楚，上网查资料众说纷纭。主要是对于胰蛋白酶消化干细胞的过程，简单点说，就是用胰蛋白酶加入长满细胞的克氏瓶中（已提前吸取，弃掉培养液），来回摇动，使胰蛋白酶铺平培养面。是不是只要铺平了，细胞就在消化中，不用反复继续摇动？胰蛋白酶的消化能力有那么强吗？才0.25%啊。0 z1 J+ C8 ~' w
, M! P3 A! H( M* O8 H
除此之外，中和消化许多人采用血清或者是HANKS‘液，其后也需来回摇动，使其与培养面均有所接触。对于血清和胰蛋白酶的比例，网上也各有说法，麻烦各位战友能不能说说各个说法的原因。反正我们是用10%。
' B7 r- U9 I4 ~/ p7 t
/ o" q6 ~* ]: ]最后，对培养面先用混合液（胰蛋白酶和血清）对培养面进行吹打，后用PBS或者HANKS’液进行多次吹打，我是新手，对于吹打有些顾虑和疑问？忘战友指教。个人认为用混合液时，由于细胞已经被作用消化过了，随便吹几下就行，然后用PBS或者HANKS'液进行仔细吹打，对于吹打的次数和力度，还有时间总是掌握不好，时间长了，怕细胞损失多，力度大了怕细胞机械损失大。用一句话解释啊，哥成了一个矛盾体啊，晕。忘广大战友赐教。

突击兵之小土豆

还有一个题外问题，那就是有一次，细胞处理的有点多，发现消化时有一些白色团块，师傅说是消化过了，经过吹打以后，可以打散。
% p/ e" ?- v3 Q& A. h$ h# i
0 O( F+ i) ^3 K: F7 t由此，想多嘴问一句，要是一直用胰蛋白酶消化，让细胞都消化成团块，吹打不就省力了吗，但是人家说消化成团块后，对细胞很不好。但是你想想，回头离心后，吹散，细胞不也是悬浮状态吗，也是分离的，感觉没啥区别。$ ^6 J7 t8 H* m: H! w/ i5 E

2 x1 @  Z  r$ h0 B+ s' i. k+ a3 Y希望大家指正我的各种错误想法！