大家教我一下组织贴块法的秘诀吧？

mbpsky

上周我做皮肤组织贴块法。直接洗净剪碎至1mmx1mm，未消化，直接种在90mm培养皿中，间隔0.5cm。在培养箱孵育了1hour后补充加了4ml.当时已经贴住了。但五一假期之后发现部分组织块浮起来来，也未爬出细胞。高手指点迷经。

HMC

呵呵，这个方法本来对于皮肤组织块就不保险，建议使用培养瓶培养或酶消化方法

hxf_86

如果你坚持用组织块法，我倒是有2个建议的方法：- c$ J2 u. ?. k; h% b8 p4 d
1、铺胶。matrix胶或者明胶，可以让细胞和组织块贴得更牢* N, y( v4 Z- e7 c' u0 u$ C9 f" G
2、用玻璃片把组织块压住。当然，玻璃片要经过很严格的消毒的

mbpsky

回复 HMC 的帖子: }; A1 R4 z& u3 q
5 L4 _) C; N+ [6 C) ]1 k  r5 V5 D
这位兄台，我是在做组织贴块法哦，不是酶消化法。

mbpsky

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" {$ Y7 L+ ?" s6 `
& f6 v. `- y# w哦，有没有技术上的好办法而不是改进材料或者增加实验难度和其他耗材的消耗量的方法呢

HMC

好办法就是你技术上要严谨，少加液体，尽量不要频繁移动

mbpsky

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哦，这是个注意点。在时间上和其他细节方面有没有要强调的？比如多长时间加液啊，什么时候首次换液啊

HMC

& N  n+ G, W) o

# k" V1 o2 K- s( s' f其实没有必要经常换液，可以根据液体代谢情况进行换液

yxwfly

估计贴壁的时间太短了，贴的不结实，建议延长到4-5个小时。

牙牙丫丫123

组织块贴壁法，最好是培养瓶培养，过夜后加液，但是要在贴壁后倒置的瓶底加一些液体以防干燥