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讨论皮肤成纤维细胞原代培养 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-1-25 09:58 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
   本人上周二取了自己胳膊上的细胞进行皮肤成纤维细胞的建系,一周过去了,贴壁率只有10%左右,我用的是M106的培养基,请问大家的意见,这样的生长效率能在本月30号前冻存吗?还有,以给位的经验,原代培养一般需要多久才能冻存?
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沙发
发表于 2011-1-25 15:36 |只看该作者
佩服。

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金话筒 优秀会员

藤椅
发表于 2011-1-25 22:13 |只看该作者
luyoutian 发表于 2011-1-25 09:58
& B/ P0 E! [3 ]6 Y" ?( R' @0 |本人上周二取了自己胳膊上的细胞进行皮肤成纤维细胞的建系,一周过去了,贴壁率只有10%左右,我用的是M1 ...
4 @* S1 D- \% v8 u
楼主这强悍呢,我们以前做表皮的时候用的贴壁法,不知道楼主是什么方法?酶消?贴壁?通常要看组织块的大小了,先用60mm的培养皿这样细胞克隆比较容易富集,扩增比较快。我以前用的是DMEM挺快的,原代一般是两个星期就可以冻存了,换一次液看看吧,估计楼主的状况30号冻存有点少
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板凳
发表于 2011-1-26 09:45 |只看该作者
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回复 tangyvhuang 的帖子$ _2 g% \, N; \: |' x
/ [! {2 u# q# J# D7 @  I9 b) j
我用的是35mm的皿培养的,贴壁法,酶消化法,生长的确实有点慢,准备加点生长因子下去看看
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报纸
发表于 2011-2-9 13:56 |只看该作者
强人吖!应该要传个几代才能冻存。

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地板
发表于 2011-6-19 19:54 |只看该作者
迟看到,想和楼主交流一下.<皮肤成纤维细胞>

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发表于 2011-6-19 21:27 |只看该作者
细胞数够就可以冻啊!加生长因子后就是疯长!只是是否对其有其他影响尚不确定,和所加的量相关性较大!组织块法一般两周左右开始有细胞爬出,酶消化法要快很多,长满25mm的培养瓶估计最晚一周长满。所用培养基为L-DMEM
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