心脏干细胞如何避免被污染呢？

laoxuejiu

开始做实验了，是从成年大鼠取心脏进行培养，但是老板不让在超净台里取心脏，所以两次了都污染了，我觉得还是在从大鼠身上取心脏的过程中污染了，大家有什么好的办法，或者您怎么做的，能赐教吗？？急求！！

zhuanzhuan

你多加些双抗 试一下 或者将屋子用紫外照射一下之后再取心脏

daviddow

放在5-10倍双抗中，取材的时候在超净工作台里。

jhu132llh

拿个灭过菌的手术器械去下心脏，放于在冰中充分预冷的一个小瓶（小瓶灭过菌，里头装75酒精）里，冰浴5-10分钟。
/ r5 H1 @9 r) B操作台内准备预热的加了常规PS的PBS，把心脏从酒精中取出后就在PBS中洗涤上3-5次，然后接着操作就行了

laoxuejiu

谢谢各位了，我会按照上述建议去做，论坛偶有些不便，我弄了个qq群，群号是126925521，希望大家能互相帮助。

laoxuejiu

不好意思，楼上兄弟提的加了常规PS的pbs，中的PS指的什么？
% J7 X: F. y! M9 W我好久没做实验了，真的不太知道，还有大鼠取心脏之前需要在酒精中浸泡吗，多少时间好，我在别的实验室做实验呢，所以得听人家的，老板不让在超净台里取，因为还有别人做细胞培养呢，又没有单独的超净台，所以只能是在一个外部环境中做了，也没有紫外灯消毒，只能满屋子喷了些酒精。" e: s  l; D9 r5 H% {% o
还有楼上兄弟提的5-10倍的双抗是什么概念？例如我的pbs是100ml的话，需要加入多少双抗？谢谢大家了

bulu123

直接用酒精泡着心脏 细胞不会死么. T8 @1 J4 {8 C' {$ K2 ?5 ]7 N

sunshy2772

请问为什么很多做的文章都是取大鼠的心脏相关细胞，而小鼠的很少呢？

afei198520

紫外灯也没有，楼主的环境相当的恶劣啊，呵呵。
9 e0 z: g% x! V8 w不建议用酒精泡。* H0 P( U" r6 c3 Q
如果实在是没有办法，就多喷点酒精，手术器械高压，培养的时候多加点双抗，然后听天由命。
8 J( ~  C( E& j! \3 ^- w# k! X祝楼主好运！

happybb

用一个医用胶袋罩住！当然要消毒胶袋内部！将需要无菌操作的步骤在医用胶袋内完成！同时你要把大鼠的切口附近的毛剃光消毒！用酒精加蒸馏水煮沸，将蒸汽导入胶袋！使消毒胶袋内部处于正气压！这个方法比较讲技巧！要操作者有一定小聪明