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, I, c6 a" C! Y1 M4 F
[hide][/hide]BL O T T I N G, HY B R I D I Z AT I O N & DE T E C T I O N:AN S & S LA B O R ATO RY MA N U A L1 G& \) i) {, P. z# ]* ^. T: t% j2 c# k
TABLE OF CONTENTS: T2 [7 S# P! j5 ?6 B; Y5 A
TR A N S F E R, HY B R I D I Z AT I O N & DE T E C T I O N O F NU C L E I C AC I D S
" w6 q- A9 }+ XSouthern Transfer onto S&S Membranes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .2
1 Q7 ^. t& v+ {0 |Northern Transfer onto S&S Membranes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . .1 25 p9 _( O$ z% Q) J: B' g
Nucleic Acid Dot-/Slot-Blotting onto S&S Membranes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .2 0
" h) e6 J4 s0 ~* A; ]1 U* VColony/Lifts onto S&S Transfer Media . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . .2 4, K `5 W6 |& V' D' V) {; c' \" e& R
S i g n a l-to-Noise Enhancement . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . .2 8: k, ?) ?+ p5 n. }
Solutions for Nucleic Acid Transfers . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .2 8
' Z: H5 d' b/ [7 P2 NNucleic Acid References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .2 9
% f5 ?0 @8 ~# HTR A N S F E R & DE T E C T I O N O F PR O T E I N S
" H/ [0 Q7 ]& z7 R. U- g& X8 dProtein Transfer onto S&S Nitrocellulose Membranes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .3 0" n( `7 X" c" P' A7 a5 v
Protein Transfer onto S&S W e s t r a n® PVDF Membranes . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3 8
$ q! `8 A- U6 r2 h$ y u( N! y0 yProtein Dot-/Slot-Blotting . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .4 2% N1 C4 s% f* w3 N9 X2 n* d5 s
Protein Transfer onto NA 45 DEAE Membranes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . .4 4" ~ E; }9 G5 Q x. w, g' j
Protein Transfer onto NA 49 CM Membranes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .4 6
$ b. B" W: m5 e# \4 UTroubleshooting Western and Dot-Blot Assays . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .4 7
# A' A* G0 {, J$ x$ }Solutions for Protein Transfers . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .4 7+ ^2 H, f9 z; _8 u% }& ^, }
Protein References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .4 8
6 G. C! X. \% K# W1 WS & S ME M B R A N E SE L E C T I O N GU I D E . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .5 0/ O$ ~0 r1 ?- G, z
NU C L E I C AC I D PU R I F I C AT I O NME T H O D S) S) o W9 i v+ @, i" `: }8 J
Isolation of DNA from Agarose Gels . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .5 4
, |5 M, r& L/ W2 f; t+ ^Purification of Plasmid Mini-preps . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .6 0
4 m# r% G/ ]; J. xPurification of Oligonucleotides . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .6 4) v1 X; r5 |0 b) [% K2 A
Purification of PCR Products . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .6 6, s* k$ {4 |" E$ a9 f# w
Purification of Genomic DNA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .6 8% b: i' u6 i; D, ]/ ?4 i
Purification of RNA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7 2
7 K( ?/ @" E) kNucleic Acid Purification Appendix . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7 3: ?3 b3 W" \2 ^# ^7 j0 t9 V
Nucleic Acid Purification References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7 3; V8 K: D& P2 G4 s5 T! f8 ]
MI S C E L L A N E O U S TO P I C S$ F7 k5 ?2 O5 g, U8 h/ C4 K
Removal of EtBr from Gel Staining Solution . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7 4
* ~; e, K, b8 X5 P/ cElectroelution of Proteins from SDS-PAGE Gels . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 。. .7 8
4 h5 `, I4 V$ ]5 K4 Y! }Miscellaneous References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .7 9! M3 R! h2 |) p6 ?. W
Ordering Information . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .8 0 |
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