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本帖最后由 细胞海洋 于 2010-11-3 16:06 编辑 3 I+ @7 N3 k3 J: `& `' O
( |6 o8 R/ Q! E- A' h[hide][/hide]BL O T T I N G, HY B R I D I Z AT I O N & DE T E C T I O N:AN S & S LA B O R ATO RY MA N U A L
1 d6 d+ y+ P9 ?) g C7 f, k. h* ]TABLE OF CONTENTS( X7 Y8 f. ?* j$ E$ N# s K
TR A N S F E R, HY B R I D I Z AT I O N & DE T E C T I O N O F NU C L E I C AC I D S
2 }6 \: Y8 J8 T3 Q, Q; l! lSouthern Transfer onto S&S Membranes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .2
. e6 [5 @8 N9 o9 ]Northern Transfer onto S&S Membranes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . .1 28 t3 L$ W. t* M# q7 Q9 ^3 H9 I4 R
Nucleic Acid Dot-/Slot-Blotting onto S&S Membranes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .2 09 x0 P1 U" z, M6 M
Colony/Lifts onto S&S Transfer Media . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . .2 4) w5 P G; Y7 R& M- ~
S i g n a l-to-Noise Enhancement . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . .2 8
. `0 |$ W! E0 `( v* T/ ~" _0 wSolutions for Nucleic Acid Transfers . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .2 8. O! \* \9 V9 J6 L3 t+ C
Nucleic Acid References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .2 9% L( B1 J7 Q% p- l
TR A N S F E R & DE T E C T I O N O F PR O T E I N S
" p, P8 b' {' M. S( wProtein Transfer onto S&S Nitrocellulose Membranes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .3 02 y: q' O$ {; Y, z9 \% k/ P( H- O
Protein Transfer onto S&S W e s t r a n® PVDF Membranes . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3 8* H5 ~. O/ O# E( Z4 p) p
Protein Dot-/Slot-Blotting . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .4 2/ B4 N- {, T5 M/ G, g5 W( o
Protein Transfer onto NA 45 DEAE Membranes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . .4 4. @3 x Q+ _$ |% @; o5 t
Protein Transfer onto NA 49 CM Membranes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .4 6/ V$ S% w K* [1 n2 {" O: I" x5 c
Troubleshooting Western and Dot-Blot Assays . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .4 7) H6 I+ ]& i3 |+ B
Solutions for Protein Transfers . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .4 7* x9 I! E% v; M \' z) q; Q
Protein References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .4 8* e; X! z7 T0 \
S & S ME M B R A N E SE L E C T I O N GU I D E . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .5 0
, x6 F. h# M7 y! m6 TNU C L E I C AC I D PU R I F I C AT I O NME T H O D S3 \. M$ V" a) ~( k7 S7 y; _$ p
Isolation of DNA from Agarose Gels . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .5 4* y8 G( ~. ^7 X% A- F9 o
Purification of Plasmid Mini-preps . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .6 0: U& C t3 I- D. n j( a
Purification of Oligonucleotides . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .6 4* I# b' ^! U( Y3 @; I9 U; E
Purification of PCR Products . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .6 6
; w* J/ B7 }2 ~! K3 ~9 N6 OPurification of Genomic DNA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .6 8
5 d" e# o" z' A) o3 |Purification of RNA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7 2
5 Z" J1 `1 k# @7 VNucleic Acid Purification Appendix . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7 3
; |7 }/ i; d- G0 ^+ U5 BNucleic Acid Purification References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7 3
7 i) c# D/ X5 ~1 n7 a9 C. VMI S C E L L A N E O U S TO P I C S7 R" a& [- h5 N- a
Removal of EtBr from Gel Staining Solution . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7 4
3 [ S f. {) G7 _% CElectroelution of Proteins from SDS-PAGE Gels . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 。. .7 8# z2 j# F6 Z' k4 O$ E: U9 u
Miscellaneous References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .7 9
d/ w X* a H! |- {4 X1 dOrdering Information . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .8 0 |
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