细胞培养不贴附怎么办？

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我是新手，我在做细胞培养时，我的细胞养了一天多还不贴附，是什么原因呢？我做的是肿瘤细胞

xbs530515

先不急着下结论，不要动细胞，继续放两天，仔细看看，有没有贴壁的细胞，哪怕是一个？如果有，恭喜了，肿瘤细胞就算是单克隆繁殖也应该可以成活的，此时可以将上清去掉，进行换液培养，细胞少换液的间隔可以适当延长，等到细胞多了再进行传代。但如果放了几天连一个细胞都没有能贴壁，那么你的细胞就多半是挂了。
7 J, @4 w$ i: z# @4 V1 Q$ w还要想问问，你的细胞是刚复苏的，还是传代的。是什么细胞？第一次养的新细胞，首先要搞清楚细胞特性，是悬浮还是贴壁培养，使用的培养基及血清，是否要添加细胞因子，等等。
) g6 w" U4 k/ o不贴壁的原因太多了，不好做结论，只能逐一排查。

get0715

如果楼主是刚开始做这种细胞，首先要弄清这种肿瘤细胞是否是贴壁细胞，如果是，那么为了使细胞活性增强可以先从增加血清的浓度开始，多培养几天，5-7天之后没有贴壁的细胞基本就是死细胞了。
7 U0 Q4 ], v) s" h' b) k1 N肿瘤细胞的种类很多，要多了解其特性，多查些培养方法，多提供些你的实验过程，大家才能有针对性的对问题进行讨论，相互学习。

lili9999

虽然是肿瘤细胞，也分贴壁和不贴壁生长的，首先要知道细胞种类。一般上皮类的细胞易贴壁，间质类细胞不易贴壁，所以就有差异贴壁法分离细胞这一说。建议你如果实验室里能拍照，拍下来给大家看看，更好为你分析。$ [9 e1 p7 O& E: _+ r5 `* X! ~
你做的是原代的吗？如果是可以先把血清浓度加大，我最大加到过20%，细胞状态很好。
' V' A7 x7 B( ]; A# `# K; z另外，知道有无污染很重要，可以先在高倍镜视野下看看，能看到布朗运动的东西就危险了。也可以做革兰氏染色。总之，细胞培养是很费心思的。

lxl069

你应该写详细点，细胞名称，培养液，培养环境，怎么操作的。太笼统啦