肿瘤干细胞基因表达情况的分析

jitianxing7021

战友们
& \. i0 P2 j1 A, q' b! Q我最近利用球培养筛选干细胞8 O* l& ~: m* f' C; E
最近RT-PCR 结果表明筛选的球形成细胞干性基因的表达水平低于原来细胞株

hcoohboy

回复 1# jitianxing7021
4 N8 L( u* D! L' q( g
* l' P0 d- z1 ]7 ^7 ~+ ]' p0 Z  ~6 H3 K
    1. 首先是否确定你的球培养体系成功建立？0 j% I6 u% M6 D1 n( z
    2.你选择了哪些些干性基因？可能不是所有的干性基因都会上调
* e) E& q6 W1 Y4 w# v" N    3. RT-PCR存在假阳性，再重复试验或用免疫荧光检测
0 d$ n, C+ y; b: g# Q3 N3 W- B2 @+ y  _' V# M8 I0 X7 c5 Y
个人建议

jitianxing7021

回复 2# hcoohboy 6 q5 M! `8 l$ D6 L
: i0 Z$ R( j+ ]* M

/ Z  K; n2 y+ f' ]( b" g    我的干性包括BMI-1 NANOG,NOTCH-1,ABCG20 e  e/ d# c0 L9 x. U2 c+ ]
    我在想是不是接种的细胞密度有关系了
! j: o6 c& V  ^; N  我的球细胞已经传代了二十代了
! R7 M, ~) a7 i应该建立起来干细胞

jitianxing7021

免疫荧光做了一个beta-catenin
1 I5 u& L0 j1 v发现成高表达，在细胞浆和细胞核内

hcoohboy

回复 4# jitianxing7021 ; ?) s. }+ Z! D* ^- z4 e; m" i

2 v( L1 _2 d2 z. F% |: b0 Z9 b% D( r1 |/ ?* u# G) X
    这个结果还是不错的！

hcoohboy

回复 3# jitianxing7021 7 g# F% {8 H9 d2 k% x
! s: k* m6 ~7 h  r

8 o& B. |' ?0 ?2 f  `  O# k4 j0 k    试一下向裸鼠皮下打瘤，这是金标准

jitianxing7021

是的7 ^# K- @0 E/ k" Q% C
这个说的对！但是我想把基因表达做好, F/ I% W  l* F2 g/ C
因为现在功能试验已经没有新意了
" R) F4 {! e$ F3 c; B6 t现在关键是能找到肿瘤干细胞特异的表达因子

xiongliangxl

学习关注中~希望楼主继续汇报实验进展~顶~

hcoohboy

回复 7# jitianxing7021
# h' w0 A5 y! j5 J5 B4 y  `5 W; A0 R7 v0 _0 i' S
8 X3 ~& R8 w- I+ c7 y3 L
    但这个比较耗神，可能最好做芯片，才能筛到新的调控因子什么的~

wzx6660

支持，很有参考价值