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[请教] 跪求脐带间充质干细胞的鉴定方法-免疫荧光技术

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发表于 2017-10-24 10:46 |显示全部帖子
最近在做染色体异常核型的脐带间充质干细胞的课题,需要做免疫荧光检测方法。看了国内外的一些。都写得相对简单。寻求详细的操作方法。万分感谢!

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发表于 2017-10-24 10:48 |显示全部帖子
急用

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发表于 2017-10-24 16:04 |显示全部帖子
这个细胞各大文献几乎没有人染,UC-MSC 有特异性的 marker 么,可以染 CD 分子啊

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发表于 2017-10-25 10:09 |显示全部帖子
干细胞之家微信公众号
回复 缥飘实验员 的帖子1 s6 S6 R# Q# Y4 _  v+ K$ n

  M1 u9 F0 O/ J5 u我检测的是CD105,CD73,CD34,CD45 就是缺少详细的操作方法,包括一抗和二抗的选择。

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发表于 2017-10-27 10:51 |显示全部帖子
哎,帖子就这么沉了啊

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金话筒 优秀会员 帅哥研究员 小小研究员

发表于 2017-11-1 15:30 |显示全部帖子
要做核型分析吧?找第三方出报告~

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发表于 2017-11-2 10:49 |显示全部帖子
回复 baby00000003 的帖子
/ P! E  _2 {/ \0 f( Y, n5 g9 D& Z/ g5 p/ a( `) u7 O
不是做核型分析是做间充质干细胞的表型检测,用免疫荧光的方法检测

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金话筒 优秀会员 帅哥研究员 小小研究员

发表于 2017-11-2 14:34 |显示全部帖子
回复 SKC-SFC 的帖子; ~4 q8 u5 _' E
4 @/ \& O9 ^) y
做表型的话,流式多好~操作比IF简单,而且更有统计学意义

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优秀版主 金话筒 优秀会员

发表于 2017-11-6 10:50 |显示全部帖子
脐带间充质干细胞一般不做免疫荧光染色,一般做流式检测。阳性CD分子有CD90,CD105,CD73.阴性CD分子有CD45,CD31等。不过你要做免疫荧光染色也可以的,一抗选小鼠或者兔抗你要的CD分子的抗体,二抗选择荧光素(一般是红色和绿色荧光)标记的羊抗鼠和羊抗兔的抗体。具体操作应该有很多方法的,这是非常常用的技术,你们实验室肯定有人会。关键是抗体不要相互干扰。另外再用Hochest(蓝色荧光)染细胞核,这样三标的照片很漂亮的。

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发表于 2017-11-14 13:19 |显示全部帖子
回复 bin 的帖子
) r3 W; I# O; ^7 D( }% Y. c
& Z% w3 Y' k: D1 d+ Q" C8 U谢谢您。我们流式做CD105,CD73,CD90,HLA-DR,CD34,CD45,CD44,CD29,CD11b,CD19.免疫荧光更多的是做膜内表达的CD分子。或者分化成神经干细胞等细胞的一个鉴定方面。
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