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讨论去除PBMC中少量红细胞方法     [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2017-7-7 09:49 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
近期,提取的PBMC中含有少量红细胞,请问大家有什么好的方法去除红细胞,不影响白细胞活性和后续培养的。有好的红细胞裂解液也可以推荐。
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沙发
发表于 2017-7-7 10:31 |只看该作者
吸取白膜层的时候尽量慢慢吸取,不要吸到红细胞
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藤椅
发表于 2017-7-7 11:17 |只看该作者
回复 只因偶然 的帖子: t2 B" E* b- j1 P9 ^  F8 J+ |% j* k. \+ ^

7 D8 Y- U9 e: M) U& j" @' Q  U用裂解液后期长不起来的,用分离液再离一次试试,或者后期长起来后用注射用水裂解试试
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板凳
发表于 2017-7-7 11:38 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 只因偶然 的帖子% {& L' f' w# U
; v, ^  X& }  _- k$ T
试一试高渗与低渗的PBS,先用1.8x的PBS处理几分钟,再用等体积的2.2x的PBS中和,然后离心。处理时间以及回收率就需要用你的经验把握了。
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帅哥研究员 美女研究员

报纸
发表于 2017-7-7 13:26 |只看该作者
先hes沉降后ficoll分离
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金话筒 优秀会员

地板
发表于 2017-7-7 14:06 |只看该作者
1.上ficoll是用盐水充分稀释& ?$ l/ H, [( @) K3 e* D* N
2.离心降速时减少震动。
8 `" w- C3 Y  s8 A& c6 U, l3.吸白膜层时要轻柔。
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发表于 2017-7-7 14:10 |只看该作者
再上一次ficoll即可
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发表于 2017-7-7 14:28 |只看该作者
如果不是使用适合的分离液,并掌握好恰当的离心力和离心时间等,基本上都会有一点红细胞。要完全去除基本上只有用裂解的方法,裂解液或低渗的方法
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发表于 2017-7-7 16:25 |只看该作者
回复 王宏伟8901 的帖子, z/ l: W- K# T+ ^

1 Z% M: J5 |; V! L, |5 e& k  _# V红细胞跟白细胞混一起了
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发表于 2017-7-7 16:26 |只看该作者
回复 翎宝 的帖子
- K, ]$ [: m# p1 F  f4 g( \7 ?4 ^" O% D& ?$ U' {: e  y$ {
所以问是否有好的红细胞裂解液
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