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[请教] 崩溃,茜素红染色又没有染出来   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2016-11-20 12:26 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 城墨 于 2016-11-20 12:27 编辑
- m) R! [# X" C/ s8 D
9 r, Q$ |3 n6 U+ U  C% b7 z3 d第三次染色了,每次成骨诱导都是大半个月时间8 B- y! k7 f! g) Y: G$ \! n" K
今天是第三次染色,依旧什么都没有
0 w4 G4 Y4 Y" ~6 {# `) P9 F3 q我的做法是,MC3T3-E1细胞,在VC和甘油磷酸盐的成骨诱导下14天。8 E+ e( V$ }  \$ J
做AR染色,先PBS洗细胞,再95%乙醇固定10min,再蒸馏水洗三遍,最后茜素红溶液染色。
+ h' i( t, S4 t  C+ t0 s: N问题是茜素红我已经用过很多种了,买来的,索莱宝0.2%的,没染出来;自己配的,sigma粉末,0.1%,PH 8.3,用Tris配的,还是没有;1%,直接用蒸馏水溶解的,依旧很淡。5 d0 A  B* S) @
感觉镜下能看到钙结节啊,是不是那种致密透亮的?
, S: A7 b2 ~" e' S2 c% l不知道哪里出了问题啊,我还打算染MSC呢,这个染色一直做不出来,真是让我太烦恼了。
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沙发
发表于 2016-12-16 15:38 |只看该作者
传个图啊

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包包
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金话筒 优秀会员 研讨会精英

藤椅
发表于 2016-12-21 19:33 |只看该作者
用的什么牌子的血清?会不会是时间不够,我去年做的时候,做了17天没有结节,做了26天就结节很多了,,,
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板凳
发表于 2017-1-11 10:09 |只看该作者
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本帖最后由 是你啊 于 2017-1-11 10:10 编辑
% X1 \1 f9 j( c- h0 ]6 d" N* e  G9 E( f& O
我也染不出来,求指教。实验太虐心
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小小研究员

报纸
发表于 2017-1-14 22:30 |只看该作者
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