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分离人胎盘间充质干细胞时,选的是那块部位或结构呀,也请教有没有详细的操作方法! [复制链接]

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发表于 2016-9-25 09:27 |显示全部帖子
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9 J  i% Q% B- t" a  ^: e2 [( c' w- I! ]# A# f
胶原酶Ⅱ消化,结合羟乙基淀粉沉淀法能较好地从人胎盘组织中分离出间充质干细胞;
2 @# M5 T5 n; r. K9 l7 @( B产胎盘 , 剥除羊膜 , 取胎儿面胎盘组织 , PBS反 复冲洗 , 用眼科 剪剪成碎片 , 加入质量分数 0.1%胶原酶 Ⅱ ,  于 37 ℃消化 45min, 过 100目筛网 , 收集细胞悬液,  室温下以 1 000
4 }" H; i$ n; x0 e3 s9 ~r/min离心 5 min, 弃上清 。 用 PBS重悬细胞 , 加入质量分数 6%的羟乙基淀粉 (体积比为 4∶1)充分混匀 , 室温静置 45 min, 小心吸取上清 , 1 000 r/min离心 5 min, 弃上清 , PBS洗涤 2 次 。 按 1 ×106 /mL的接种。
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沙发
发表于 2016-9-25 09:27 |显示全部帖子
回复 mozhibu 的帖子: T8 k* f: C- |9 Z9 x0 B

$ {& N7 \+ o: ?5 o, e- E2 M9 S胶原酶Ⅱ消化,结合羟乙基淀粉沉淀法能较好地从人胎盘组织中分离出间充质干细胞;
; D8 f# n5 a0 |$ `产胎盘 , 剥除羊膜 , 取胎儿面胎盘组织 , PBS反 复冲洗 , 用眼科 剪剪成碎片 , 加入质量分数 0.1%胶原酶 Ⅱ ,  于 37 ℃消化 45min, 过 100目筛网 , 收集细胞悬液,  室温下以 1 000
4 Y1 D- Z& r( F  tr/min离心 5 min, 弃上清 。 用 PBS重悬细胞 , 加入质量分数 6%的羟乙基淀粉 (体积比为 4∶1)充分混匀 , 室温静置 45 min, 小心吸取上清 , 1 000 r/min离心 5 min, 弃上清 , PBS洗涤 2 次 。 按 1 ×106 /mL的接种。
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