干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 41871|回复: 11
go

原代细胞污染   [复制链接]

Rank: 1

积分
26 
威望
26  
包包
185  
楼主
发表于 2016-6-11 11:27 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
最近取脐带,组织块法培养脐带间充质干细胞,顺带取脐静脉内皮细胞,离心后接种细胞就看到有细菌在活跃,觉得可能是天热所以容易滋生细菌,该怎样减少污染呢?急急急!
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
368 
威望
368  
包包
2103  

优秀会员

沙发
发表于 2016-6-11 12:12 |只看该作者
加点双抗或者肝素
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
349 
威望
349  
包包
1491  

优秀会员 金话筒

藤椅
发表于 2016-6-11 14:22 |只看该作者
离心后接种细胞就看到有细菌在活跃?
  b- F3 v/ H$ J" _2 R$ x这个从取样到离心的操作时间有多长,如果时间短的话不大可能是生长的细菌,细菌的生殖周期在30分钟左右,一开始的数量不会很多!
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
300 
威望
300  
包包
969  

优秀会员 小小研究员 积极份子

板凳
发表于 2016-6-12 08:13 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
首相自检一下各种试剂和耗材,安全柜培养箱是否是无菌的,在保证标本无菌和无菌操作合格的情况下,一般很难被污染。加点双抗可以预防一下,但不能依赖加双抗来避免污染。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 2

积分
244 
威望
244  
包包
1350  

金话筒 优秀会员 小小研究员

报纸
发表于 2016-6-12 08:50 |只看该作者
回复 chenguangyu 的帖子4 ~% D& }2 u- \9 k: k
; {4 a; \& J5 i" N" H  J
抗生素的量一定要控制好    对细胞的生长有抑制作用    而且时间太长的话  细胞的形态很差   流失很难检过     
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
165 
威望
165  
包包
778  
地板
发表于 2016-6-12 08:53 |只看该作者
初步判断这种污染储存脐带的溶液或者容器有问题,先去自检一下,如果都没问题可能就是取脐带的过程有问题,双抗和肝素钠是需要加一点的,你的这种情况我不认为是耗材或者是你操作过程有问题
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
327 
威望
327  
包包
1472  

优秀会员

7
发表于 2016-6-12 08:59 |只看该作者
用PBS洗洗,然后加双抗试试
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
499 
威望
499  
包包
1968  

金话筒 优秀会员

8
发表于 2016-6-12 09:58 |只看该作者
脐带保存液是不是污染了?这么短时间就可以看到细菌,除了这个问题,只能是你处理样本时间放置太久了,同时留取样本可能也有一定问题。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
737 
威望
737  
包包
2660  

金话筒 优秀会员 帅哥研究员 小小研究员 热心会员 美女研究员

9
发表于 2016-6-12 10:22 |只看该作者
组织块法培养的话,在分离华通氏胶前先用加了双抗的PBS反复清洗至没有血污,然后要保证整个操作过程的无菌、器械的灭菌是否彻底等。。。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 2

积分
126 
威望
126  
包包
645  
10
发表于 2016-6-12 10:36 |只看该作者
你先检测一下组织保护液是不是污染了,其次加点庆大或者肝素,注意无菌操作
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2024-5-30 11:18

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.