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六孔板加胰酶量   [复制链接]

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楼主
发表于 2016-1-17 19:16 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 1195963542 于 2016-1-17 19:16 编辑 $ m5 t5 Q0 R- i+ g2 e$ V
  r4 s5 a9 B& X0 B% G$ }, z: o
6孔板加胰酶的浓度和胰酶的量  推荐是多少呢  
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沙发
发表于 2016-1-17 20:36 |只看该作者
1ml够了,前提是要覆盖上整个底面。控制时间在5min内
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藤椅
发表于 2016-1-18 08:59 |只看该作者
回复 1195963542 的帖子
5 W7 i  u! |- G+ F5 D
1 g$ Q  ^( |! g6 O0.25胰酶(不含钙、镁离子,含EDTA),6孔板的一个孔加0.5ml-1ml即可,消化时间根据细胞类型和细胞密度不同,一般为2-5min。
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板凳
发表于 2016-1-18 09:14 |只看该作者
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加0.25的胰酶,每孔500微升-1mL,最好在37度反应2-5分钟,过程中可以显微镜下观察,细胞呈圆亮的状态,飘起来了就可以终止消化了。
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

报纸
发表于 2016-1-18 10:46 |只看该作者
加0.25胰酶(不含钙、镁离子,含EDTA),每个孔加0.5ml-1ml,放入细胞培养箱可以加速消化,消化时间根据细胞类型和细胞密度不同,以镜下观察细胞呈圆亮的状态脱离底面为准(即刻终止胰酶消化作用)。
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地板
发表于 2016-1-18 11:12 |只看该作者
回复 nichifanlema2 的帖子
' H5 c3 S, G6 z+ u& H6 u. k
1 b" |& u9 o0 ^: k& K8 R正确

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发表于 2016-1-19 00:12 |只看该作者
EDTA胰酶的话,300ul足矣,但是很奇怪的是,如果是24孔板,则需要至少500ul,不知有没有其他人发现了这个现象呢?
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发表于 2016-1-19 14:55 |只看该作者
0.1--0.25的胰酶,6孔板的话每孔0.5-1mL,最好在37°左右5分钟,过程中可以显微镜下观察,细胞飘起来了就用血清类终止消化,如果是用来传代就去离心把胰酶离掉。
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发表于 2016-2-2 13:30 |只看该作者
回复 king8 的帖子- [  F; j( [1 a3 i* y1 o1 i
. O+ `5 ]5 l" K" K4 E3 _
谢谢

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发表于 2016-2-2 13:31 |只看该作者
回复 nichifanlema2 的帖子# B3 K7 y3 p$ t8 }: F9 O- @

  _, ^& f4 m* J3 o! _谢谢
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