请教有关活细胞染色和分辨

baby00000003

请教各位老师，可有一种染色方法，可以让活细胞和死细胞之间产生明显的颜色差异么？（苔盼蓝不算）
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  N1 f0 Y& Y) B$ ]6 E6 m实验目的是“连续观察某一培养体系中细胞群体的生存状况”，
4 u1 b" s3 g' V8 k! @5 o9 r3 U即是说，不是染一次就完事儿，而是随着染色（一次性染色或者将染料添加至培养基都可以），细胞的生存状态可以随时反复观察。6 l1 ^7 m2 F1 l4 C) p# C
所以trypan blue 或者PI annexin-FITC之类的一次性方法就行不通了
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0 G: ^# |, T: d比如，使用EGFP基因转染组成型表达，活细胞即表达EGFP，可见绿色（我还不清楚这种蛋白完全降解失色需要多久）1 o- a% H- V4 O  y# z
或者有某种可以指示线粒体活性的染料，只要细胞活着，线粒体就有荧光之类的6 _- u7 B8 t1 j$ T( F' ~4 K5 c( F: R

8 @. E, T0 c2 X3 q4 J9 ?3 S各位老师有做过类似实验的经验可以分享么？0 \" A% b/ ~+ N2 d, c/ F
多谢啦！

ytumuyangren

我可以理解为你只观察细胞的状态么？那样你就可以用慢病毒包装GFP基因即可，转染至需要观察的细胞，荧光显微镜下就可以观察了，只要细胞活着GFP就会一直表达。

baby00000003

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6 N" p9 ?, b# B那个办法麻烦呢～又浪费钱～
: o5 I' @: y, |" Z$ J/ k我的理想是能在培养基里加某个试剂或者预处理下细胞，简单又便宜的) p8 h7 ^' r0 ~# H: h. u
只要它活着，就能一直发出可观察的信号，荧光、特殊颜色神马的～

ytumuyangren

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3 K" `& m9 ~& [/ v这个好像不好办到，目前了解没看到有这样的对细胞无毒无害还能发出信号的试剂。