脐血来源的单个核细胞诱导CIK，细胞增殖缓慢，什么原因呢？

mengnancy

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0 z! V9 L+ {. e, `/ f- C
非常感谢，细节上我还需要改进。

xinquan15

回复 mengnancy 的帖子7 a, g8 U! \6 D/ ~

# T/ o" q. ]# _6 b" }" eFICOLL离心步骤条件800g可以，但是要室温或者18-20度较好，不要4度1 [5 C! Y1 l. e! z4 i/ A- L* P* W

liutianhua

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( G$ r9 X4 v  Q8 N) n" d
单抗用okt3比较好，有个同力海源的也还可以，培养基的话用551表型很不好，单抗的浓度还有IL-2浓度只要在一定范围内就没什么影响。

sciencesky1

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) {: }# G2 x$ \) ]) Y) J1 J" S! J7 x* o7 P  U
大少爷，我刚刚接触脐血CIK，我们买的IL-1/IL-2都是peprotech的，单位都是ug，我想问问你，ug和U是怎样换算的，怎样配100 U/mL的IL？十分感谢！

sciencesky1

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; x) |- |, ?1 R; E+ i# w3 @0 K
+ O! v5 ~: }  z' \; M8 a7 |不好意思，我还有个疑问，我用分离液分层后，发现红细胞层上面那层也有点红，也就是说ficll层里也有红细胞，你把红细胞层之上的所有液体转移至离心管，那收集的细胞里是不是有许多红细胞呢，你又是怎么处理的呢？问题比较啰嗦，谢谢你！

大少爷

收集的单个核细胞中红细胞多时，降低离心力，洗涤两遍，继续培养，其实影响不是很大，一周左右后当cik细胞增多时，扩瓶，红细胞就不怎么明显了，你放心的培养就是了。  p# @$ d+ E) g0 x9 I
另外，前几天（第二到第五天）换液时，将细胞悬液离心后，加新培养基重悬细胞，这样可以去除多余的杂质，细胞状态会稍微好点。* T1 z. G; B# y# I' c. ]

  U' q1 G9 v) Z* A$ ?. h$ R" CCIK细胞很好培养，呵呵》》》

sciencesky1

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. G; ~6 T: S# m. ^0 \+ s1 Y
" t3 B  C& Y, p$ u& e4 m3 f好的，我知道了，十分感谢您的回复！

jiefengbing

在分离单核细胞时应当注意离心机的升速跟降速，并且最好用水平转头，你所说的没有分层，是否有这方面的原因所影响？一般来说，ficoll离心液应该问题不大。在从离心机取离心管的过程中，注意不要晃动。* r' H. Y- D, C, A3 `2 L) L
另外细胞增殖缓慢，可能跟培养体系有关系.takara的那种培养液培养CIK不太好，要是非要用那种培养液，应当加自体血清或者2%的白蛋白，下次你可以试试看。

wjp130

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' P3 z4 {: |2 _9 w3 z0 H7 G
) M  M2 [3 B% t% `请教，最近用脐血养CIK，开始都增殖很好，到8天左右时候，会出现小的絮状物，细胞增殖也变缓慢，甚至停止增殖，不知道是什么原因，我加的是脐血血浆，每天全量补充TL-2，请教了，谢谢

细胞海洋

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