脐血干细胞复苏现象请教

anzhida0823

脐血干细胞复苏时，融化时时一块一块像浮冰一样好呢 还是整个一块缓慢融化好呢  请各位大侠不吝赐教，谢谢！

三月桂花香

复苏去掉铁盒子吧，然后表面用酒精擦拭下下，放入37度水浴锅迅速复苏。

细胞分裂

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; a, s( i) j* O3 a/ l" _' m6 `
4 A5 g) h2 z* b3 q; s当然是去掉铁盒子比较好了，然后用薄膜手套装住脐血袋，放在水浴锅里解冻

deshenglll

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# [8 d, U0 _+ i
谢谢

jack1381818

回复 deshenglll 的帖子: ]7 i1 l% U% C3 i9 s
; U$ {0 o8 v. ^; J
建議
# u5 e! y% m+ N+ N/ d1.你可改用15ML小管以300G離心5-10分' 理論會比50ML管好
) A. i+ e# r3 e2.紅血球lysis的處理；若細胞或組織有脂肪團塊的干擾，建議多用幾次40 μm filter進行過濾以排除干擾。2 h7 e9 ~# k  F1 }
3.改用使用磁珠系統的原理就是搭配不同的單株抗體或多株抗體標定於磁珠上，再用此磁珠來挑出目標細胞

deshenglll

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! q) T. y7 W1 j* g+ w; I: }2 l
* G1 S! d: ~+ L  n那你们那有没有谁做过的，求详解。我们这复苏后血都是浑浊状，离心离不到单个核细胞。

anzhida0823

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7 s! |0 T9 S- g! K  F; y1 ~' a7 [5 u! `2 g5 Z+ H6 `# B8 A
不好意思，因为个人工作性质原因，我没有亲自分离过，但是据我所知脐血体积小于60ml就基本上什么都分离不出来了。

jack1381818

回复 deshenglll 的帖子. A6 W# H+ s8 [6 I: N
' Y7 G  E" X' U/ q7 }  w* `4 d3 Q
建議加入CD34、CD45、7-AAD、标本一起加的孵育10min后立即上流式机检测，结果测出的细胞活性裸眼看不準

jack1381818

回复 deshenglll 的帖子& _. N# b. M* G$ o/ z$ H7 @

5 \; ~+ c. B: r+ ~. ]# L建議加入CD34、CD45、7-AAD、标本一起加的孵育10min后立即上流式机检测，结果测出的细胞活性
7 U$ l, O5 F2 D/ E裸眼看不準

jack1381818

建議加入CD34、CD45、7-AAD、标本一起加的孵育10min后立即上流式机检测，结果测出的细胞活性( y2 V3 V! J$ ~. R4 b& M* a, Y" _
裸眼看不準