干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站
标题:
细胞培养箱污染的问题
[打印本页]
作者:
tingting2113
时间:
2015-11-17 08:56
标题:
细胞培养箱污染的问题
最近实验室用的细胞培养箱发生污染了，下面是那样直接往里面倒水的，最近发现里面长了类似霉菌的菌落，有一个培养基里发现也有，扔掉了。别的细胞未见。
7 t- D( @, r, ~, G
因为箱内细胞较多，且目前未发现问题，就把水处理了，然后用酒精擦过之后继续培养。但是还有这样的状况。
; h5 e$ ?$ S9 m7 J9 o% S0 @
想问问大家这样的情况怎么处理，有没有好的经验分享一下（除了甲醛熏蒸），谢谢~~~
作者:
watchen198891
时间:
2015-11-17 09:46
培养箱的水盘出现问题，首先按照你的方法把培养箱用酒精处理，然后让其闷过夜，慢慢去除酒精味，同时解决掉你染菌的培养基，有怀疑的全部隔离处理，检查无问题再用，并且你的水盘最好用酒精烧一下后在使用或者用消毒液浸泡清洗后再用。
作者:
Michael_HT
时间:
2015-11-17 11:27
如果是标准的GMP车间的话应该装了臭氧杀菌器，先用酒精擦拭培养箱，培养箱门打开，开臭氧熏蒸，再就是培养箱水盘里面的水最好是纯水仪制的水灭菌后再用
作者:
tingting2113
时间:
2015-11-17 11:47
回复
Michael_HT
的帖子
& A+ ~" R3 P0 u; C
/ w0 P# X' [9 N: z7 _
我们只是一般的大学实验室，没有那么高端的杀菌器
，水都是买的纯净水然后高压灭菌。
作者:
tingting2113
时间:
2015-11-17 16:17
回复
watchen198891
的帖子
9 l/ s& V2 S5 n, U
$ u h3 ^% V6 n- [% m7 z1 E; r
培养箱不是那种可以移动的水盘，而是直接倒水的那种。谢谢提供的方法~~~
作者:
帝国黑骑士
时间:
2015-11-18 09:53
回复
tingting2113
的帖子
' j6 }( k7 R" x! F5 `
2 t' B3 R* ~' y
你用的是什么型号的培养箱啊？既然出现这样的情况，建议赶紧彻底消毒，酒精消毒是不够的，培养箱是否自带有高温消毒？你可以试试消毒片，然后用移动紫外车辐照！
作者:
月_幻影
时间:
2015-11-18 14:32
真菌的污染一般比较顽固，建议使用洁尔灭或者酒精彻底擦洗（戴手套）；然后给培养箱做一个90℃的灭菌再重新使用；水盘的水使用前要做灭菌处理，平时可以在水盘里加些硫酸铜来抑菌；还有就是平时在使用培养箱时要注意清洁，比如：拿放培养瓶时双手要喷洒酒精后拿取等……
作者:
yooung
时间:
2015-11-18 15:39
污染这么严重，应该不只是水盘的问题。是整个培养箱都被污染了。应该把培养箱内所有拆的都拆了。像隔板之类的可以灭菌的，就先清洗（用洗衣粉和刷子），清洗后直接灭菌（干热和湿热都可以，干热要好些）；不能灭菌的和培养箱内壁一样，先用新洁尔灭（84消毒液）清洗（擦拭），再用75%酒精清洗。水盘还是用无菌水冲洗多次，再加有硫酸铜的灭菌水，保持一两天后换掉，再新的硫酸铜溶液。此外，培养箱外壁和培养箱所在的房间也要用新洁尔灭（或84消毒液）消毒。
- u, T; n: F' a8 E% X& L5 g7 z% n
最后有条件的，还是紫外消毒一两小时，无论是箱内，还是房间。
作者:
zsykdx
时间:
2015-11-23 14:03
建议使用移动紫外车辐照。没有的话把培养箱门打开，直接拉两条紫外灯管用透明胶贴在门口照过夜。在学校时我们就这么干的。。。
作者:
tingting2113
时间:
2015-11-24 14:10
回复
zsykdx
的帖子
4 r3 j. K) W& K; n2 e/ R
: O: P- U8 z) ]
恩恩，谢谢，这个我们在实验室比较还好实现
作者:
tingting2113
时间:
2015-11-24 14:11
回复
帝国黑骑士
的帖子
8 p# s" O) L8 B1 ~
# h, b( N: E. B; t
消毒片是什么呢？
作者:
zsykdx
时间:
2015-11-24 14:56
4 _0 U" {4 U0 |% F1 T3 K/ J# {
当培养箱的箱体被污染时，应按照如下方式对培养箱和内部附件进行清洗和无菌消毒处理．
6 m6 H' y* Q/ U( ~. N( ~
1 取出培养箱内的所有附件和增湿盘；2 移去风道，侧板，搁板和扇页；3 用中性洗涤剂清洗所有的附件，然后用蒸馏水将残余的洗涤剂冲洗干净；4 用浸泡酒精的纱布擦拭附件进行灭菌消毒，然后用干纱布将残余的酒精擦除干净；5 用浸泡酒精的纱布擦拭培养箱内壁，然后用干纱布将残余的酒精擦除干净；6 将所有的附件重新放回培养箱内．；7 将无菌蒸馏水注入增湿盘．按照这样的操作就可以了用酒精擦拭培养箱所有内壁(包括门)以及隔板(上、下都要擦），然后紫外照射。8培养室建议清洁后，用40%甲醛熏蒸30分钟以上。取放培养物品时注意手和培养板用酒精擦拭后再放进培养箱。
作者:
gd541767393
时间:
2015-11-24 16:26
把水全部清除，75%酒精擦拭整个箱体内部，如果培养箱有高温消毒功能，直接操作即可，如果没有可以用甲醛熏蒸，也可以把紫外推车的灯管放进去紫外消毒，水应该是高压过得蒸馏水，为了避免污染，在水里滴几滴消毒液，如果用甲醛熏蒸的话，尽量多开门放几天的，使甲醛挥发出去
: ?/ T3 K# V- E5 o
作者:
gd541767393
时间:
2015-11-24 16:27
而且培养箱要定期消毒
欢迎光临 干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://stemcell8.cn/)
Powered by Discuz! X1.5
，水都是买的纯净水然后高压灭菌。