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标题: 关于脐血单个核细胞冻存结块的问题 [打印本页]

作者: 孙帅帅    时间: 2014-2-28 14:03     标题: 关于脐血单个核细胞冻存结块的问题

为什么我们冻存的脐血单个核细胞在复苏的时候总是出现结块呢?有什么解决方法吗?或者有哪位大神能够提供几篇关于脐血单个核细胞冻存的文献(时间不要太久的)或者无血清冻存液的文献!我们是用的90%的自体血清+10%的DMSO,冻存时候放到程序降温盒中!
作者: luyue6453    时间: 2014-3-1 11:39

本帖最后由 细胞海洋 于 2014-3-3 12:36 编辑   ^8 ^: `, Q  s$ p, |; L, _8 x

4 E' p, n6 d, c5 x% X回复 孙帅帅 的帖子5 m# [" `0 K: F! K
$ F' m& G4 _) T+ \4 f. j
我以前看到文章,看看对你时候有帮组
作者: 孙帅帅    时间: 2014-3-2 11:24

回复 luyue6453 的帖子6 ~* }9 E0 C/ Q! L7 p* y
6 p; q# M/ K  z, H# b/ k$ N
非常感谢!!!
作者: 孙帅帅    时间: 2014-3-2 11:24

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7 b9 u! {$ g' a' u* f+ ?非常感谢!!!
作者: 孙帅帅    时间: 2014-3-2 11:24

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作者: 孙帅帅    时间: 2014-3-2 11:24

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# l  q2 Q& I. N! O. z, ~非常感谢!!!
作者: fuyinsheng    时间: 2014-3-3 13:54

首先你的细胞可能在降温过程中温度有明显波动,使细胞溶解,其内的胞浆等物质流出会出现团状现象,也有可能是离心力过大把细胞离碎了,你可以适当下调离心速度看看情况有没有好一些,另外确保降温过程中能够持续降温。
作者: a52602589    时间: 2014-3-5 11:02

血清56度灭活,30min离心掉沉淀蛋白就可以了
作者: swtarron    时间: 2014-3-5 16:16

1.有没有可能是分离时脐血有凝血,因为有的凝血开始是检查不出来的,我就遇到过开始的时候没有凝血,然后离心完后发现血浆中有絮状沉淀,也是凝血的一种。
9 m* }0 p4 s2 N2.复苏是水浴时间的长短问题,细胞在冰晶期是非常脆弱的,如果时间太长,会造成细胞死亡,可能出现结块。0 U5 F8 M. V5 R% ?2 b4 [! O

作者: crystalzyj    时间: 2014-10-16 16:54

楼主,请问你这个问题解决了吗?请问是怎么解决的呢?跪求指导,谢谢!
作者: 细胞海洋    时间: 2014-10-17 09:03

回复 crystalzyj 的帖子9 r, R# R2 D, [+ r& I6 ?6 O
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作者: sdudai    时间: 2014-10-17 09:20

自体血清?滤掉中性蛋白等蛋白质了,一般自体血清使用是需要处理的啊
% {3 V- a# L% v( r
. V2 U7 T5 T; d9 o
作者: sdudai    时间: 2014-10-17 09:22

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