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标题: 急请教防脱玻片 [打印本页]

作者: 湖南干细胞    时间: 2013-4-24 13:06     标题: 急请教防脱玻片

本帖最后由 湖南干细胞 于 2013-4-24 13:09 编辑
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请问防脱玻片用于细胞培养的,要用经过多聚赖氨酸及APES都处理过的吗?用于人脐带间充质干细胞诱导分化培养的
作者: wf78365421    时间: 2013-4-24 15:41


) ~/ Y8 S- A/ f! b" L多聚赖氨酸玻片如何处理?/ u4 k' Y" l; J$ \1 j( L$ O
          多聚赖氨酸玻片的处理方法及细胞的固定方法:6 D+ Y2 t0 D) {7 G8 L0 M5 r% Y
$ D3 u9 C) {6 a0 g' B' ]
        (1)把玻片清洗干净,最好用酸清洗一次,然后用蒸馏水多次冲洗,去除玻片表面所有的杂质。
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        (2)把清洗干净的薄片放入烘箱中160℃烘干(2-3h)。( \" ?$ l) ?7 i/ E9 q8 A
6 z/ \) T3 Q9 U- o, P
        (3)烘干的玻片放入一定浓度的多聚赖氨酸(浓度可参考文献)溶液中浸泡5-10min。
' K: K  a' D2 M  L. M. q2 T! n6 g; G7 n( o$ q
        (4)取出后放在无尘的地方晾干。' J6 K% n: ^7 R( V# Q! Q
3 t( a; S! ]; W$ o
        (5)晾干后的玻片放入密闭的盒子中在4℃冰箱中保存,可以使用2个月。, @6 W6 i  J5 X/ q! B2 F

2 i8 ^+ h9 v0 M% \, j  J, ^; ]        (6)吸入100-200μL的悬浮细胞液,加入多聚赖氨酸处理的玻片上,轻轻摇动,使溶液分散到玻片上,等待3-5min后加入测试液。" u: p- R" S+ K" |- F9 C( {
3 r2 a# v  h( |3 s1 c
        (7)在显微镜下观察细胞是否已经固定。. {, R" \! F9 }7 {3 l
* L. a# [4 Y2 ~4 E: U! o# p
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0 Z  A  F& |. I( K* p( M# v
        固定的原理:
* A0 @& o" k( Y3 F  G/ o$ i; [6 o- L2 z4 ]* B  D
        细胞表面带负电荷,多聚赖氨酸带正电荷,因此只要浓度合适,细胞就可以很好地粘附都多聚赖氨酸上。
作者: wf78365421    时间: 2013-4-24 15:41

整个处理过程注意无菌
作者: aminhair    时间: 2013-4-24 16:55

wf78365421 你说的是免疫组化的吧?楼主要的是细胞培养所使用的方法。
作者: 湖南干细胞    时间: 2013-4-25 08:47

本帖最后由 湖南干细胞 于 2013-4-25 08:49 编辑 0 D3 n/ ~. c! D  W; K& v

& H- {1 v* c9 M回复 wf78365421 的帖子! f  @  V) T* o, n

, P6 w1 x: [) b' j' a谢谢,我想买防脱玻片用于细胞培养,不知道买经过那种处理的玻片好,有没有推荐的货号和品牌?
作者: 细胞海洋    时间: 2013-4-26 23:54

回复 aminhair 的帖子
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你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样
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否则他会看不到
作者: toncv    时间: 2013-4-30 22:56

直接6孔板养不就好了
作者: toncv    时间: 2013-4-30 22:56

直接6孔板养不就好了




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