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标题:
关于NK的讨论
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作者:
ljl1988115
时间:
2013-3-20 08:48
标题:
关于NK的讨论
不知有没有做过NK细胞的同学，不知道大家是怎么养的？希望做过的同学能解答一下，我看文献上有用滋养层细胞的，不知是什么情况，有做过的讨论一下吧！
作者:
wwxx66
时间:
2013-4-20 19:15
国外做的很多都是用饲养层细胞养的，K562细胞经基因工程改造，可以表达一些膜分子，在膜分子的的作用下，NK细胞可以大量的增增殖，最大扩增倍数可达到21000倍！国内也有很多专利讲到这些东西。你可以去国家专利局网站上查找。
作者:
weijunning
时间:
2013-5-8 16:02
可以不用饲养层；选用德国产的一种用于NK细胞培养基（比较贵，2000元/瓶，500ml/瓶），选用关键细胞因子IL-2，OK432，可以进行很好的NK细胞培养。
作者:
永远的伊凡
时间:
2013-5-22 16:31
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weijunning
的帖子
7 t8 h" R+ a. u4 J6 \) U
) v; H: C a. h$ @! u* Q/ X, H4 x
能不能讲具体点呢，像需要加的因子的量、加的时间先后等等
作者:
yangpan521
时间:
2013-8-14 09:26
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weijunning
的帖子
( o3 x# g& c* R' e( k6 L6 Y4 \+ T
# P v: E* ]8 r+ ?7 X7 Q7 l
能不能发一些相关的信息呀，比如饲养层的选择、因子的浓度等 最好有相关的文献 谢谢
作者:
weijunning
时间:
2013-8-14 11:52
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永远的伊凡
的帖子
; p5 S4 ]) @! n; C
1 N# Y% U2 j! @, e4 \
OK432有配套的溶剂去溶解，1g用一支配套的溶剂去溶解就行，配出来的是1000X母液；需要铺细胞当天加；IL-2的工作浓度为1000ug/ml 在当天加；之后扩瓶培养基只加IL-2因子就行。
作者:
永远的伊凡
时间:
2013-8-14 15:43
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weijunning
的帖子
- ~0 M( r4 [4 ]7 Q. [! @" ?8 c- n
9 t4 \) _. l- K& a, n) D L/ A+ J# n
很有用，谢谢！
作者:
zhenhuale
时间:
2013-8-19 13:40
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weijunning
的帖子
7 @1 o4 ~, \% p2 h8 z7 G# g' r
3 j9 k: [$ {9 Y7 {
我用德国的培养基和OK432都试过培养 有文章也报道过该种培养方法
# B, K* C7 o0 m' p; y: k# Q5 y
但是培养效果不理想，请问您培养多少天可以得到多少的细胞量，CD3-CD56+比率多少？谢谢！
作者:
weijunning
时间:
2013-8-19 14:23
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zhenhuale
的帖子
3 w0 F/ ^& R: I, H0 d: n1 x, \
7 L6 P, z0 R. d; ~% H$ N' Q
我们正是用此方法培养的NK。一般在第10天才开始进入快速增殖期，之前增长比较缓慢；由于其对数生长期滞后，回输我们定在第15天，这时细胞数能达到2.0X109左右。CD3+CD56+一般在35%左右。
作者:
ljl1988115
时间:
2013-8-21 16:39
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weijunning
的帖子
) A) w; h* W/ G7 M* W
u5 G% N O4 }$ m2 f4 v/ x
NK的表面标志抗原应该是CD3-，CD56+吧，双阳的话不就是NKT了吗
作者:
weijunning
时间:
2013-8-22 09:35
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ljl1988115
的帖子
% y$ q9 b# q0 D' M1 P
0 b% Z. w- L6 d/ k& {2 b
对，你提的很对；属于个人输入失误。一般CIK才会以CD3+CD56+作为质量的指标，即NKT样淋巴细胞。
作者:
wwxx66
时间:
2013-9-18 17:56
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weijunning
的帖子
- @8 [' L1 U# w) v* ^
/ s V1 F" s# t a" v
您好，配套的溶剂是什么呀？多谢
作者:
wwxx66
时间:
2013-9-18 17:58
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weijunning
的帖子
4 k/ I: k. r2 x# K
' O8 M8 x& U" d- g! W$ J" m
你好，培养出来的细胞收获时用不用大量的盐水来洗一洗？OK432里面好像有好多的青霉素啊，会不会过敏？
作者:
大海之家
时间:
2014-3-6 10:25
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weijunning
的帖子
# K' \# s G: r' P; [/ M
* W) g' k2 I8 x0 O$ @# }
这位前辈，有没有文献支持你说的此种方法，另外，听说饲养层细胞培养的NK数量可以达到一百亿，表型可以达到90%。
作者:
大海之家
时间:
2014-4-1 09:24
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zhenhuale
的帖子
\2 M, A: X3 a. f
5 r2 l2 h9 h! T) s
这个德国的培养基是不是干细胞培养基？是采用包被诱导还是悬浮诱导的？
作者:
大海之家
时间:
2014-4-1 09:27
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weijunning
的帖子
3 H0 o' y/ u( w: ^ r5 d
! J3 L; L" r* w/ ?6 r
请问是包被诱导还是悬浮诱导？培养基是不是造血干细胞培养基？最终的培养体积大概是多少？
作者:
孙张艳
时间:
2014-5-13 21:26
有具体的流程吗？求啊
作者:
yangpan521
时间:
2014-5-18 22:51
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weijunning
的帖子
- u6 c& Y) M3 [
; Y) d" j; i' j8 R$ [5 |. G" D
您好，看了您对NK的评论，想问您有培养NK的流程吗
作者:
xuning1106
时间:
2014-11-5 19:35
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ljl1988115
的帖子
: L' D) o7 d( O" E
/ v3 @9 y1 c7 c. y7 I3 X& t
CD3CD56双阳是CIK细胞
作者:
王苍金
时间:
2016-1-21 16:31
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weijunning
的帖子
5 f1 t- b0 A# n B3 b U
% G" e5 }- l/ U( [" d6 }
我应该加多少单位的ok432，培养 nk，开始是50ML培养基。
作者:
细胞海洋
时间:
2016-1-22 11:26
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王苍金
的帖子
6 K& B* I6 G" X! Y1 @$ |
7 l$ D. c" A4 U7 X
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