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标题: 流式抗体可以做免疫组化吗？ [打印本页]

作者: huajie881026 时间: 2012-11-7 00:33 标题: 流式抗体可以做免疫组化吗？

买了BD的鉴定MSC的流式抗体，鉴定完了，现在将细胞打入动物模型，想做个免疫组化看一下细胞是否募集过去，请问我能用做流式的抗体吗？BD的这个抗体是直标的，能做吗？

作者: 86964109 时间: 2012-11-7 08:10

直标的话信号会相对较弱吧，个人感觉还是别浪费了吧

作者: sysuhoo 时间: 2012-11-7 08:13

这个是可以做的，不过楼主的方法有问题。; O3 X" ?& Z, T5 u. \
按照你的思路是不能看外源MSC迁移的，最好的方法是用gfp标记外源msc后注入
因为你的方法也能检测内源的msc，而且msc在各个组织都有
个人意见，仅供参考

作者: ljs 时间: 2012-11-7 08:43

1.楼主做流式的抗体，如果做组织切片的话，应该是免疫荧光，而不是免疫组化。0 y4 m6 d' P1 w2 }; l3 S6 z+ d
2.有的流式抗体可以做免疫荧光，有的不可以。而且对组织切片有要求，如固定方法，石切还是冰切，以及抗体的稀释倍数等。
3.也是我个人的意见，不推荐这样做实验。3 G4 p; c6 }. j% f
（1）首先楼主要看抗体的说明书，进口的流式抗体的说明书都有说明抗体的适用范围。; W; f" R9 v; s& k. \) \: a
（2）流式抗体都是一抗标记荧光基团，如果做免疫荧光，没有二抗的扩大信号，很可能结果会出现假阴性。
4.总而言之，能否应用在免疫荧光，看抗体的说明书，如果说明书明确说明不能做其他的实验类型，就不能做。如果没有明确说说适用范围，楼主可以打电话给技术支持。

作者: huajie881026 时间: 2012-11-7 08:49

回复 ljs 的帖子9 o7 Y9 `" f# V- p

谢谢指教！抗体说明书上是没有写免疫荧光这一项的，只写了FCM，也没有说能不能做免疫荧光之类的。( \4 r {& T: z7 c
再次感谢您的解答！

作者: aidiulgy9517 时间: 2012-11-7 09:38

回复 huajie881026 的帖子1 H' Q6 L0 Y9 g2 u
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可以在用荧光抗体免疫染色（流式分析）后将MSCs滴在玻片上，用荧光显微镜观察，看荧光信号是否足够强，然后再决定能否做免疫荧光组化。

作者: yaolinzhang 时间: 2012-11-7 10:12

回复 huajie881026 的帖子

说明书上没写免疫组化，个人感觉好像不能用，楼主还是重新定购相关试剂吧

作者: yubin083 时间: 2012-11-7 13:37

只有一部分FACS用的荧光可以在免疫荧光镜下观看，这些在相关荧光谱上都有说明。另外你可以用抗一抗（直接法FACS）或抗二抗（间接法）抗体再次标记，就可以做免疫组化

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