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标题: 关于小鼠精子发生各个stage及其Marker，跪求牛人解答 [打印本页]

作者: w343989328 时间: 2012-9-13 23:28 标题: 关于小鼠精子发生各个stage及其Marker，跪求牛人解答

最近看文献，称一个小鼠SSC理论上可以发育出4096个精子，即经过12次分裂。
自己梳理了一下，有这么一些stage：
1.增殖型细胞，包括spermatogonia A-single(As)、A-paired(Apr)、A-aligned(Aal)! k+ O0 W& a- }  e1 S, U
2.决定型细胞，包括spermatogonia A1、A2、A3、A4、intermediate、spermatogonia B
3.减数分裂期，包括primary spermatocyte和secondary spermatocyte. S2 l& i+ e4 W  e; U; o
4.变型期，经过减数分裂后的round spermatid变型为elongated spermatid，再变成mature sperm1 c7 S1 ]) v6 A  I3 F$ e
4 W5 ^- ~7 o# e. u3 E9 O* |
那么，我有一些问题：
1.我查过4096的出处，是Russell等1990年出版的一本书，Histological and Histopathological Evaluation of the Testis，内容我没找到，但是从书名和年代来看，我对这个4096有点小小的质疑，不知谁能帮我解答一下。
2.这些stage是否缺少或者重复。比如说，文献上的12次分裂，这里其实只有11次分裂；再比如，我在一篇文献上看到的是将spermatogonia B直接作为primary spermatocyte，这些都让我很迷惑。1 y* z% l, p5 r7 f5 u. h: F
3.就是关于marker的问题了。用Brinster经典MACS分选出的Thy1+细胞，其实是增殖型细胞，即包括As、Apr、Aal；但理论上，只有As才是真正的SSC，现在并没有很好的marker能很好区分出来这几种细胞。那么，其他stage的细胞，有没有较好的Marker能分出来呢？如果有，麻烦注一下文献出处。

不吝感激！

作者: haijing12585 时间: 2012-9-14 08:51

您好，我有几个不太成熟的想法，和您的不太一样，不过倒是可以交流一下
首先，这个12次分裂的问题，可能是因为有人将胞质桥数数到32，有人将它数到16，实际上，小鼠的精原干细胞有能力分裂到32细胞的，如果你这样数，那么12次细胞分裂时可以发生的。
而您说的As是真正的SSC，这个我不认同，我个人认为有另外一种真正的干细胞。因为根据干细胞的定义及其他物种精原干细胞的特性，干细胞在一般状态下是静息的，不发生增殖，而As型SSC的增值能力太强。又或者其中的一部分太强。有关这方面的报到，您可以看一下去年的一片文章，作者认为Nanog才是真正的标记，这个我比较认同。

作者: w343989328 时间: 2012-9-14 09:48

回复 haijing12585 的帖子4 Z0 Y* ]! z& \% a, c- o" }3 W

谢谢您，请问文章能给一个标题或者连接吗？

作者: 490096812 时间: 2012-9-14 13:48

我也听过一个老师说过：
1.4096准确的说应该是至少4096个，ssc作为干细胞本身就有维持自我更新的能力，所以应该为4096的倍数& n- X T q) Q
2.12次分裂时没有问题的。
3.As是精原干细胞，但是在Apr和Aal也有部分精原干细胞。只不过是精原干细胞在AS中比例最大，然后逐渐减少

作者: haijing12585 时间: 2012-9-17 08:20

回复 w343989328 的帖子$ q( j6 C, o) U. O

Identification and regulation of a stage-specific stem cell niche enriched by Nanog-positive spermatogonial stem cells in the mouse testis.0 V0 G" B9 Y1 y- O- K
您搜一下这篇文章，网上可以免费下载到全文的。

作者: hcluo 时间: 2012-10-10 13:50

回复 w343989328 的帖子8 }5 H+ s5 g: r [
0 C5 P& s2 g w! [0 ?4 F
这里有些标记物，可以作为参考！

作者: wateryong 时间: 2013-2-22 09:43

回复 hcluo 的帖子
1 f$ p) z6 y7 @( E" F5 c
请问能不能把这幅图的原文章共享一下？

作者: 怡雯小叶叶 时间: 2013-3-20 18:37

是这样的，小鼠精原干细胞一般来说进行11次分裂，也就是产生2048个精子，但是在有些情况下会多分裂一次，也就是分裂12次，这与精子的需求量以及所处的环境有关，就会产生4096的精子。还有就是增值型精原干细胞什么的，其实我们不是这么分的，我们分为未分化的警员干细胞和分化的精原干细胞，未分化的精原干细胞也就是As,Apr和Aal，分化的是A1，A2，A3，A4等，用THY1分选出来的精原干细胞只是未分化的精原干细胞，并不可能只分出As，但是Apr和Aal目前有报道称，在一定条件下也是可以恢复到As状态的，目前只有一些maker可以标记未分化的精原干细胞，但是没有只标记As的，但是你做过免疫组化的话，有些Apr和Aal是可以判断出来的。另外我们在培养精原干细胞的过程中，认为As维持精原干细胞的自我更新，能形成大块的克隆样细胞，如果出现一串的细胞，认为细胞到达Apr或者Aal，也就是细胞即将走向分化，克隆就会慢慢减少以及消失

作者: 怡雯小叶叶 时间: 2013-3-20 18:40

同时，推荐你一篇文章，关于精原干细胞有很详细的介绍。All You Wanted to Know About Spermatogonia but Were Afraid to Ask，DE ROOIJ的文章，DE ROOIJ在这个领域是大牛哦

作者: 怡雯小叶叶 时间: 2013-3-20 19:06

找到这篇文章了

作者: w343989328 时间: 2013-3-22 14:17

回复怡雯小叶叶的帖子1 l. B. k+ P8 P

谢谢你！你做过SSC的IHC吗？

作者: 怡雯小叶叶 时间: 2013-3-22 14:58

回复 w343989328 的帖子
, Y$ s( \/ ?) J$ @# }
我没做过，不过我室友一直子做，我主要做ssc的转染等

作者: w343989328 时间: 2013-3-22 22:39

回复怡雯小叶叶的帖子
4 U# ^1 Z* w3 K6 [2 o1 ^+ j3 d
能不能帮忙问下，染的是什么蛋白，用的哪里的抗体。我们现在做IF，抗体一直不给力，其他需要抗体的实验也一直效率很低。。谢谢你啊

作者: 怡雯小叶叶 时间: 2013-3-23 13:42

回复 w343989328 的帖子

你染什么细胞？干细胞么？

作者: w343989328 时间: 2013-3-23 23:42

回复怡雯小叶叶的帖子2 `7 e$ V5 t9 U( w# u1 f

在这里讨论的当然是精原干细胞啊，小鼠的

作者: 怡雯小叶叶 时间: 2013-3-24 11:14

我同学没做过免疫荧光，我男朋友做过，他们那，最好用的一个抗体是PLZF，你可以试试

作者: w343989328 时间: 2013-3-24 15:57

回复怡雯小叶叶的帖子( i4 x( D/ P& ]1 n# |+ n

能问问是哪个公司的吗？还有货号。

作者: 怡雯小叶叶 时间: 2013-3-25 10:05

给我留个QQ吧，我们可以讨论，我还想问下你，你养小鼠SSC时，让细胞贴壁时加多少FBS？

作者: stemcell'shome 时间: 2015-11-19 15:14

好东西，无奈没有包包

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