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标题: 旧菜翻炒——关于细胞冻存 [打印本页]

作者: deron 时间: 2011-12-11 17:57 标题: 旧菜翻炒——关于细胞冻存

今天冻存细胞的时候忽然想到，以往不管是程序冷冻还是梯度冷冻，细胞放入-80后，都是等待过夜再转入液氮，那么如果-80放置一两个小时，等冷冻管内液体基本达到-80之后，直接投入液氮中，与过夜相比有没有差别？
是否过夜只是一个保险措施，防止冻存管内液体未到-80？有没有大侠关注或者做过类似的实验？

作者: Temin 时间: 2011-12-11 20:39

我们如果NUNC程序降温盒不够用，那在-80度放4小时左右就行，然后拿出来用。

作者: havie 时间: 2011-12-11 21:07

应该不仅是为了使冷冻管内液体达到-80吧,还要使细胞适应这个环境,以及细胞本身的变化.

作者: momocy 时间: 2011-12-12 09:53

不急着用还是过夜好一点，着急用也放上半天再拿出来，还是要等细胞适应了，万一细胞受损了，不值得撒

作者: huangcong1988 时间: 2011-12-12 12:40

其实要看你冻存细胞的种类，而且需要冻存的时间也要考虑的，比如说，细胞只需要短时间冻存，那么你直接梯度降温后放负80就可以不管了，到时候要用直接取出来复苏就行5 q- V; P! C' | a
但是如果你要长时间冻存的话，建议梯度降温后还是再负80过夜后再放入液氮罐中，因为细胞适应低温需要一段时间
有冻存盒话话可以大大节省时间，冻存盒应该也不贵，几百块钱; v' Y$ }( K6 g, Y
至于说冻存管温度达到负80就直接放液氮罐，还没试过

作者: 山羊 时间: 2011-12-12 23:25

梯度冻存放-80°4个小时就可以了，实验室有师兄就这么做的，也没啥问题

作者: 279042256 时间: 2011-12-13 10:32

我们是上午-80，下午快下班液氮，下午-80，晚上液氮保存，也就4-5个小时

作者: yyshpy 时间: 2011-12-13 14:09

对于大多数细胞应该是可以的

作者: wdx0502 时间: 2011-12-14 02:28

同意huangcong1988 的观点：方法选择由细胞而异，其实我没拿到一种细胞（陌生的）会实施对比不同的方法：包括冻存，冻存后存活率等。9 x5 I& g/ M+ J& c, J+ o& g. R

作者: houbara 时间: 2011-12-18 14:39

过夜是为了好安排工作，-80 放4小时就可以。

作者: hub12333 时间: 2012-2-9 10:01

我冻的细胞一般都是4-5小时就从-80到液氮，复苏后细胞也可以，没得太大问题

作者: shashou_com 时间: 2012-2-14 12:40

这个没试过，下次你试的时候记得给大家说下结果。

作者: houbara 时间: 2012-2-14 13:16

1. the time in -80c, depends on the cryo-vial and temperature decreasing rate. if the temperature decreasing at -1C per minute, eg, Bicell. it would be more than enough to keep cells in -80 for 4hours. To cryopreserve cells for a short time,1-3 mon, you can just leave it in -80c
2. For longterm preservation, it is better to transfer your cells into LN29 L1 t+ K! y+ O! U
3. Overnight in -80, it is just for the work convinience. ! b2 b8 k6 Y' a0 J) W
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过夜是为了好安排工作，-80 放4小时就可以

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