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标题: 国内MEF中的黑点问题 [打印本页]

作者: 573639471 时间: 2011-5-10 09:12 标题: 国内MEF中的黑点问题

最近一直都在寻找mef中黑点的问题，也在坛子里发了很多帖子及照片，但是仍没找到确切的说法，黑点到底是什么，目前看来不像是支原体，不像黑胶虫，就是小黑虫，看起来会游动，有的还有小尾巴，加了抗支原体药物后 plasmocin，有点效果。但是很困惑这种有黑虫的MEF还能用吗？3 }. V' i/ B3 q; |2 q' @; A! I; x
也看到很多人有相同的问题，故调查此，是否是国内的普遍问题呢？欢迎大家跟帖啊

作者: christophe 时间: 2011-5-10 11:09

有污染了建议立即扔掉，留着免得扩大污染范围！

作者: 573639471 时间: 2011-5-10 21:52

回复 christophe 的帖子( e6 u( O% G5 Q7 ]

如果是所有的都有呢？

作者: genedu 时间: 2011-5-16 21:42

这个问题是比较奇怪，不过国外的也有，我用的是美国犹他大学Marrio Capecchi实验室带回的129MEF细胞，他们的也有。我感觉是细胞分泌出来的东西，要不就是细胞碎片，不清楚不敢乱说啊，但是一年多来还没有污染过

作者: 前途似锦 时间: 2011-5-16 23:11

这个问题我现在就有，有的时候很多尤其是做元代的时候，有的时候又不多，很纠结很纠结啊

作者: biovictor 时间: 2011-5-17 07:42

我们实验室也遇到此类问题，怀疑是细胞碎片，或者是类似于蛋白沉淀的东西，师兄师姐们正在准备用电镜观察，来确认到底是什么东西。

作者: zxmflying 时间: 2011-5-17 12:40

我们也常发现MEF中有黑点，并且会游动，不过通常还是能用，没发生过污染。

作者: huozhicb 时间: 2011-5-21 08:05

能上个图吗？感兴趣

作者: wqcyqy0811 时间: 2011-5-21 09:45

我养的MEF细胞前一段时间也是有黑点，在高倍镜（400x）下看，发亮，还会游动，而且一般出现黑点两天后就会污染，所以我们看见有污点就扔掉了。后来怀疑还是培养基有点问题，培养基是清亮的，但是就是颜色与以前稍微有一点不同，把培养基完全扔掉后，所有的都用新的，开始重新做原代，就好了。

作者: 573639471 时间: 2011-5-23 08:51

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颜色怎么不一样？

作者: 573639471 时间: 2011-5-23 09:06

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图片如下

作者: 573639471 时间: 2011-5-23 09:12

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作者: redcam 时间: 2011-5-23 09:26

我认为是污染了，但没有深究是什么污染。一般遇到这种情况我就扔掉了，不敢用呀！

作者: yourwish140 时间: 2011-5-23 09:42

我做原代的时候也有小黑点，不过养到后来就没了，怀疑是细胞的分泌物。

作者: SCNT 时间: 2011-5-23 11:08

这个问题现在很普遍，无论培养细胞时候，还是单用培养液体测试都发现有黑点

作者: 张也行 时间: 2011-5-23 12:20

看了你的图，我得收回我的投票，我们这里的成纤维细胞也都有这种现象。但是好像不会游动啊，只是不规则的布朗运动而已吧。

作者: 干细胞狂想 时间: 2011-5-23 14:26

会游动，那肯定是微生物污染了，不会动的话，可能是细胞本身分泌的颗粒物。

作者: aminhair 时间: 2011-5-23 20:09

这个好像已经有人研究了。据说具有修复细胞功能。有人还用于修复心肌损伤。呵呵。只是听说，不一定准确啊！

作者: liuerfu 时间: 2011-5-23 22:16

我得也有这种问题，但一般不会污染。不知道是不是操作问题

作者: 宗介 时间: 2011-5-23 22:42

对与这样有疑问的东西还是扔掉的好能不用就不要用了

作者: starlj 时间: 2011-5-23 23:23

检测下支原体吧，一般如果支原体阳性，黑点会特别多，细胞状态也很不好。如果没有支原体，也会有黑点出现，隔天不换液黑点会更多。感觉黑点应该像是细胞分泌出的东西。黑点在动是布朗运动，做过钙转的人应该都知道，形成的钙转颗粒在显微镜下都是在动的，第一次做钙转的时候我也以为是污染，换过液之后就好了。建议养MEF用新鲜的培养基，常更换，黑点会好些。

作者: yinjiqingqq 时间: 2011-5-23 23:38

俺以前培养细胞也经常有小黑点出现，有些黑点还会变身，一会呈圆状，一会呈弓形。; q$ ?" {% z. g$ m% z6 J
建议你先确定是否是血清问题：可以用同批次血清培养其他类细胞，最好是成系细胞；
有些细胞就是很矫情的，如果培养条件不合适，或是代数过多，细胞周围的黑色颗粒就会变多；
如果你是做原代细胞，有可能是死细胞中的内容物什么的，不过最可怕的就是有污染了，只能扔掉了

作者: huozhicb 时间: 2011-5-24 21:34

回复 573639471 的帖子$ U! K5 S# ^7 X4 Q! |3 V/ b. b

谢谢，回头我看看我养的有没有:)

作者: huozhicb 时间: 2011-5-24 21:37

回复 573639471 的帖子7 C( P5 I( r! o0 x, X, C1 ~ u
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这是小鼠的MEF吗？如果是的话我感觉图片中细胞的状态不大好，可能你有些地方可以改进一下的:)

作者: wqcyqy0811 时间: 2011-5-27 15:23

具体不清楚原因，在100x看时是黑点儿，在400x看时，微调一下，发亮，会游动。

作者: 细胞海洋 时间: 2011-5-30 15:21

回复 f9120096 的帖子1 `$ V" g( L* M) r5 l( F

有问题请直接在论坛发帖就可以了论坛搜索黑胶虫的内容

作者: scottist 时间: 2011-7-13 15:26

如果没有显著影响MEF的状态，建议不用去理会。即便是黑胶虫现在也没有明确的定论到底是微生物，还是小分子的无机物，因为这两种东西在显微镜下看都会游动的。培皿刚放到显微镜下时，培液肯定会有一定波动，那么底下的小分子物质也肯定不可能静止，而是会无规则游动；即使培液完全静止，那么微米级的小颗粒也会做布朗运动。它可能是细胞碎片，培液沉淀，也可能是酒精灯或煤气灯的灰尘...

作者: bb6120 时间: 2011-7-15 14:31

这种黑色的东西我在MEF跟293T中都看到过！会动，但是它的活动能力差！经过传代之后这些黑色的东西又会不见了！！并且出现黑点的细胞不一定会污染，我就没碰过有黑点就污染的情况。我们这边估计他是细胞所分泌的一种物质，之所以会动是因为正压系统造成的震动而产生类似布朗运动的一种活动！

作者: ytcell 时间: 2012-1-5 16:24

我们也有黑点，原代比较多些，到后来特别是细胞长的特别密时好像就看不到了，我们也怀疑过是布朗运动。。。

作者: sino85196488 时间: 2012-2-2 12:54

刚买来的MEF是没有的，MEF传代多了后就有了，我们一度怀疑是实验室培养基的共同污染，因为，好多细胞养着养着就有小黑点了。还是要注意实验室的环境和实验操作。看到小黑点后还是扔掉吧，不然再污染到其他细胞就更麻烦了。

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