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标题:
关于提质粒的问题,求助!
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作者:
crystal
时间:
2010-12-15 12:15
标题:
关于提质粒的问题,求助!
本帖最后由 crystal 于 2010-12-15 12:16 编辑
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试剂盒OMEGA的,去类毒素中提!
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昨天没能提出来,很郁闷,也不知道是那步没对!
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没提的时候每个人都说非常简单,所以我也就认为一定很简单,照着说明书一步步来就行!
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可最后没能提出来,有老师说我第7步出错,正因为大家都说简单,所以做的时候没记笔记,到最后做昏了自己都想不起来了!
* M$ s6 N* l, u2 R' Y" }- T( c
下次一定要把笔记做好!非常重要!
2 x7 G( q, }$ U( _$ F( d
不知道有没有用过这个盒子,分享下经验!
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作者:
daviddow
时间:
2010-12-15 15:42
你在转化的细菌中,最好先挑5个细菌,小提。如果有你的需要的质粒,然后再摇菌,大提。
作者:
kostarcell
时间:
2010-12-15 15:50
楼上说的没错,小提你鉴定对了,再大提,记得把小提剩下的菌液放到4度环境,鉴定正确的就直接摇菌,省的转化了。你这种提问的方法不知道你是说自己操作有问题,还是说试剂盒使有问题。
作者:
cony
时间:
2010-12-15 20:29
如果菌液经鉴定是正确的话,那么在裂解那一步要注意,液体变清才进行下一步。
作者:
siyue13
时间:
2010-12-15 20:52
C萨满,先做小抽呀
8 {% s. U. c0 r! n4 t
常识好吧
, B3 S. {! M: P+ O, P, J
我妈问候你了
作者:
sannia
时间:
2010-12-15 21:00
我前段时间用 Qiagen的大提也是,总是没有pellet。最后我在异丙醇沉淀那一步用过夜就有沉淀了,还有溶液2和3的时候晃动的稍微剧烈一点。
作者:
crystal
时间:
2010-12-15 21:28
谢谢大家!
作者:
siyue13
时间:
2010-12-15 21:36
QIAGEN的大抽要靠重力往下滴,如果拷贝数低的话是痛苦的,除非有真空泵。不过貌似新的改进过了。大抽还是天根和MN的好用
作者:
鹤顶宏
时间:
2010-12-15 22:36
回复
siyue13
的帖子
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可以利用离心机,将柱子放在50ml的离心管直接离心就可以了
作者:
l123w456x789
时间:
2010-12-18 23:22
最后溶解少一些 一般说明书要求溶解的体系比较大 你少溶解一些 但也要把沉淀全洗下来 泡个电泳试试看
作者:
weiyepan
时间:
2010-12-20 08:04
我们实验室也有用这个kit,感觉还可以,没什么问题。
" S% z- I8 w8 a' }( V4 C8 j
如果不是wash buffer没加乙醇的话,楼主就要从培养那里找原因了
作者:
huangcong1988
时间:
2011-12-12 19:57
这是omega中提的吧?
作者:
huangcong1988
时间:
2011-12-12 19:58
很熟悉啊,不过我一般都不用这个,这个用起来很麻烦,而且浓度不能很好的保证,操作起来也不方便,建议小提,一个样提5~6个就行了,稳定性好,而且浓度高
作者:
huangcong1988
时间:
2011-12-12 19:59
很熟悉啊,不过我一般都不用这个,这个用起来很麻烦,而且浓度不能很好的保证,操作起来也不方便,建议小提,一个样提5~6个就行了,稳定性好,而且浓度高
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