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标题: ips中的疑惑（附图） [打印本页]

作者: 小刀 时间: 2010-5-5 22:48 标题: ips中的疑惑（附图）

本帖最后由细胞海洋于 2010-5-5 22:56 编辑 ( j* e5 s7 X8 a; [( j

1.培养过程中见到很多网格状结构：不知道是什么原因，我猜想是不是细胞老化：[attach]7332[/attach]
2.最近几日又见培养皿中出现如图状结构，我猜想是不是ips的克隆，但是ips的是圆的，而且周围有细胞环绕，但我的是不规则形状却没有，很像成片脱落的细胞。[attach]7331[/attach]我想我肯定是想克隆想疯掉了！+ L+ u$ [0 q* y' x, l
3.刮取了少许2中片状结构，转至24孔板中，第三天，细胞漂浮不见贴壁见图： [attach]7330[/attach]前辈指点，谢谢

作者: jiejesse 时间: 2010-5-5 23:03

你的很有可能是所谓的carcinoma stem cell，可能是你的操作过程中细胞癌变了

作者: dwc326 时间: 2010-5-5 23:09

第一幅图很像我们药物筛选的HeLa长期培养后的样子。& p/ I4 H/ g; q( J/ Y5 S3 I2 ^
首先你这个细胞是不是传代次数太多，细胞老化了？
第二传代后留下的细胞是不是太少了？因为如果传代后留下的细胞太少，缺少必要的细胞与细胞间联系，细胞生长缓慢，那一团团的东东貌似是单个细胞的克隆，等长满了，中间的已经挂了。刚学习养细胞时师姐告诉我的，仅供参考
是不是IPS还得坚定吧，不能光从形态上判定啊，丢在软琼脂里培养个个都是球，还都是单细胞克隆球呢

作者: xyzengh 时间: 2010-5-5 23:43

有时候细胞不完全重编程会出现图一的那种情况，你可以试试在这些细胞上再次感染病毒会不会有奇迹发生；如果不看边缘，我很喜欢你第二张图的“iPS细胞”，可惜...；第三长图看起来不像，但我告诉你，不是所有的ES/iPS细胞传代后都会贴壁，传代时加入Rock inhibitor会不会有改善，如果打得过散传代后几天内都看不到明显的克隆，耐心等几天看看。, ~; U/ ^& a0 S
如果这些都不行，请你参考细胞海洋超版刚刚转的我写的protocol，两种病毒体系都是我亲身试过并成功地，重复性很高，如果你所有试剂和操作都没有问题的话，我等你的好消息！

作者: Jonathan 时间: 2010-5-6 12:34

回复 1# 小刀

第一个图片，转了4因子？感觉形态变化，好像c-myc加多了一样。第二个图片，一看就知道不是ips啦。长成那样，还要挑来干嘛。ips在低倍镜下可能跟你那个看起来有点像，但是高倍镜下，我敢说LZ的那些，肯定不会很紧凑。第三个图片就不知道了，没做过。没法评论。
& {, H/ S: ]6 O3 H# i* z( W' I" ^
至于2楼说的是carcinoma stem cell，不敢苟同，单凭形态没法判断，那些也有可能是多倍体，多倍体也会长成那样。也有可能是一些基因的表达不平衡导致（此说法只是猜想，没有经过实验验证）。

作者: lorey 时间: 2010-5-10 10:54

学习了！

作者: friendly0722 时间: 2010-5-10 18:29

要是有放大的图片看看就好了，

作者: 细胞海洋 时间: 2010-5-10 19:53

要是有放大的图片看看就好了，. I- F ~ }# u V
friendly0722 发表于 2010-5-10 18:29

/ B+ m% d2 Z7 n: c* t; T9 X* O( W
$ W# ~4 p6 ^ t7 h$ } a
点击图片可以看原图

作者: 精检人生 时间: 2010-5-11 19:00

努力学习！感谢大家！

作者: 双刀 时间: 2010-5-12 14:07

楼主的是感染了几天的细胞？是人的还是小鼠的？3张图都不像ips

作者: 双刀 时间: 2010-5-12 14:08

楼主说一下你的细胞的具体情况，方便判断。

作者: mqz_11 时间: 2010-5-16 11:30

楼主，，ips真的不太像。。

作者: liufengchampion 时间: 2010-6-8 10:56

学习了

作者: wjy2003123 时间: 2010-6-30 12:54

早期的IPS不能这么下定论，首先你得进行几次传代以后，观察增殖情况以及克隆形态，关键是能传起来。

作者: followme 时间: 2010-7-19 11:02

我觉得自己像是参加专家讨论会，学习，哈哈

作者: ahfjwangrui 时间: 2010-7-19 15:14

回复 4# xyzengh * k& L0 R; Q G1 v8 h
; C- R1 o9 M0 h( U
! v% w0 u% S" t1 ~
请问你说的方案在什么地方？

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