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间充质干细胞的流式检测
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作者:
SKC-SFC
时间:
2016-7-6 15:17
标题:
间充质干细胞的流式检测
看过一些关于脐带间充质干细胞的流式检测的文献,看到很多都是每个marker和CD45在同一管内进行检测。为什么不单独检测CD45为什么每个检测管都加入CD45呢?要是造血干细胞的话是为了圈定白细胞群可以理解。但间充质这么处理不是很理解;另外间充质干细胞的FSC和SSC的散点图中的R1门怎么圈定。造血干细胞的画群是先圈定淋巴细胞群。那间充质干细胞呢?
作者:
SKC-SFC
时间:
2016-7-6 15:24
一,比如除去同型对照管外。举例三管。1.CD45-FITC+HLA-DR-PE+CD73-PerCP
2 f6 X" H* b; h
2.CD45-FITC+CD29-PE+CD44-FITC
' v2 s, ^: ^5 B! T7 o9 {
3.CD45-FITC+CD34-PE+CD105-A(单阳管比较浪费)
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二,造血干细胞的分析前,在FSC/SSC散点图中,圈定中间偏底下那个淋巴细胞群。那间充质呢?直接圈定去除杂质和碎片之后的那一大片?
作者:
SKC-SFC
时间:
2016-7-7 09:38
希望得到指导。帖子不要沉。
作者:
yingfeixiang
时间:
2016-7-8 08:38
间充质干细胞检测没管加CD45-FITC干什么,按表达的正常话,CD45-FITC表达小于2%的,按你说的protocol好像没什么意义,浪费抗体。另外做脐带间充质干细胞流式,这个是你培养的细胞吧,细胞成分单一,基本上在FSC/SSC散点图中(去除杂质和碎片后)都是间充质干细胞。
作者:
SKC-SFC
时间:
2016-7-11 10:50
嗯。我们是P3代之后的脐带间充质干细胞。散点图那个我和您想法一致。造血干细胞的话散点图中需要画出淋巴细胞群。我是看了好几篇文献里都会加入CD45 我们以前做 没有每管都加CD45。也不知道这些论文里是什么个意思
作者:
SKC-SFC
时间:
2016-7-11 10:50
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yingfeixiang
的帖子
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嗯。我们是P3代之后的脐带间充质干细胞。散点图那个我和您想法一致。造血干细胞的话散点图中需要画出淋巴细胞群。我是看了好几篇文献里都会加入CD45 我们以前做 没有每管都加CD45。也不知道这些论文里是什么个意思
作者:
yingfeixiang
时间:
2016-7-11 11:37
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SKC-SFC
的帖子
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' A8 p, Y7 o9 w! e! W' Y
不知道你看的是什么方面的文献,文献里面都加入CD45的话,是不是检测的是脐血里面的间充质干细胞含量?那也不对呀,也不应该标记CD45呀,这么做也不对呀,不明白呀。
作者:
SKC-SFC
时间:
2016-7-12 09:36
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yingfeixiang
的帖子
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8 W' T6 j9 C4 P/ |+ G1 U. O& E( M" v
您看看这个
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http://www.doc88.com/p-7456857376676.html
作者:
yingfeixiang
时间:
2016-7-12 10:47
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SKC-SFC
的帖子
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~2 ~* l. ^3 v
看过了,按它这个方案也可以,浪费点抗体就是,4色的检测,方案复杂了点,设门的原理不一样
作者:
SKC-SFC
时间:
2016-7-12 12:06
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yingfeixiang
的帖子
6 N: d1 C3 D7 g4 N- Q9 b
0 V$ I6 B* U2 _% F- G9 `9 z- m9 `1 M
按文献这么做该怎么设门呢?谢谢
作者:
yingfeixiang
时间:
2016-7-12 13:49
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SKC-SFC
的帖子
6 |6 V* l; X6 {/ c, e% [2 E2 w
7 D) M W& F$ t! p* h3 s
他这个和咱们做的没什么区别,就是需要荧光补偿调节这繁琐点,散点图上和你之前做的一样,以前你是做两荧光的,这个是四荧光的。只是坐标组合不一样了
作者:
SKC-SFC
时间:
2016-7-12 17:30
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yingfeixiang
的帖子
# G' A1 z# {5 p4 I! u. E) N
+ L$ b% c A( c/ E3 E
这个我懂了。谢谢
作者:
yingfeixiang
时间:
2016-7-13 08:27
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SKC-SFC
的帖子
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Y. f1 Y* }4 Y% T% ?7 N1 \8 V
客气,相互学习
作者:
刘小明
时间:
2016-7-19 15:41
具体可以参照ISCT 的标准,CD45是为了排除造血系细胞的污染,具体是淋巴细胞;至于共同标记是为了更加准确,但个人理解单独加应该也可以的
作者:
SKC-SFC
时间:
2016-7-29 09:16
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刘小明
的帖子
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单独加是可以就是管数更多。谢谢您的宝贵意见!
作者:
SKC-SFC
时间:
2016-7-29 09:17
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刘小明
的帖子
3 i {1 i$ Y/ ]1 P
7 K" E. ?# R( Y* ^* Q
我知道CD45是排除造血的干扰。但同时都检测CD34和CD45貌似有点重复。文献中每个管都加入CD45感觉和我们之前的造血干细胞的方法一样?
作者:
SKC-SFC
时间:
2016-7-29 09:18
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刘小明
的帖子
# F7 |" u# D4 Y) p
: Y: d/ i+ x( m
因为我们这个是传代传到P6代的间充质细胞的是属于组织细胞了。为什么还每管都加这个抗体。这个浪费抗体的理由我实在不明白。
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