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标题: 请教各位老师有关collagenase [打印本页]

作者: baby00000003 时间: 2016-1-20 14:45 标题: 请教各位老师有关collagenase

请教各位老师，' S& y: Y3 j; ]$ D0 J4 r3 A( l
如果用于组织消化，含有collagenase的缓冲液需要特别加入Ca2+么？
比如，sigma网站上的trouble shooting说，5mM的Ca2+是这种酶活性最好的离子环境，
但一般用于冲洗、缓冲的缓冲液都是不含Ca2+的，# j# g; d4 t" z4 q1 ^/ q" I [
是否先用无Ca2+的缓冲液洗涤，再用特别添加Ca2+的缓冲液配collagenase消化效果是最好的呢？

作者: nichifanlema2 时间: 2016-1-20 18:33

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9 u( u z- p( o4 ~
消化多能干细胞的话，collagenase可以用基础培养基配制，如DMEM等。配好后分装冻存在-20度。

作者: ytumuyangren 时间: 2016-1-21 08:40

回复 baby00000003 的帖子4 [) ]* n, A: d! ^' C6 M4 a

不用那么麻烦啦，消化下来的细胞用什么样的培养基培养就用什么样的培养基溶解collagenase，如楼上所述配好分装后直接冻存-20度，但是切记配好后的collagenase是储存浓度哦！

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