细胞被什么污染了，求解

yiwuya007

见图片，细胞从大鼠骨髓冲出来，培养48小时，贴壁细胞会越来越少，培养基变黄了，显微镜下细胞外未见小的微生物。
5 L; ^# J. T0 R8 m8 O细胞质内在显微镜下见到透光性好的小微生物，聚集在一起，细胞濒临死亡，看见小的微生物从胞质内向外流出来。10倍和20倍镜下都能看见。, u: x) F  V( J1 y  n9 i$ R
大家看看，这个是什么污染了。  E: C% a2 y$ v7 `9 \
开始以为是支原体，用了抗支原体的药，没有一点效果。常规的双抗（青链霉素）都加了。
- E) d4 @# v0 y6 m; A一直困扰着，细胞养不出来了，呜呜呜

鸵鸵

从图片细胞状态看像真菌污染，但从胞质往外流出的情况没有观察到过，所以不能确定

顾哲

回复 鸵鸵 的帖子, n$ Y* z$ I, w7 F% W1 ~
& V  m6 P" ?% v' [8 h" T1 e
你可以放到40倍镜下多看看，我就是在40倍镜下看到大肠杆菌等

hdna287730127

酵母菌？或其它球菌？

snowny007

看着不像污染，如果是可见细菌污染，培养后期不会如此纯净，更不会是真菌。支原体需要检测才能确认，因为抗支原体试剂不一定就有效。

yooung

不懂。不过细胞死亡，为什么一定要是污染，会不会是培养基的问题。

yiwuya007

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试过不同品牌的培养基，也试过不同公司的FBS，结果都是这样的

yiwuya007

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对，培养液没有浑浊，只是培养48小时就变得非常黄

snowny007

回复 yiwuya007 的帖子2 {4 k0 i6 f- @1 `7 ?  {
9 C) V4 b/ W1 ^+ A: t6 C  G
支原体污染是看不见的，细菌、真菌污染做一下微生物检测就知道了，还有个我自己体会的小技巧，细菌污染严重的话培养瓶内有一股刺鼻味，像药剂。如果都没有的话，那就说明没污染，培养基颜色变化与ph值有关，想想是什么导致了ph值变化，加了过量血浆还是有杂细胞消耗营养等等

feifangli

感觉不像是污染。会不会是其他原因导致细胞状态不好。