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[请教] 明胶溶液的配制   [复制链接]

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包包
-5  
楼主
发表于 2010-5-17 15:34 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请问铺培养板用的明胶溶液是怎样配置的?我现在有的是明胶粉末,谢谢大家指点!

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包包
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沙发
发表于 2010-5-17 16:21 |只看该作者
一般干细胞培养铺板的浓度为0.1%,有些人用0.5%。用pbs溶解,水浴溶解彻底,建议用sigma的明胶。溶解后高压灭菌或直接过滤既可使用。
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藤椅
发表于 2010-5-17 16:24 |只看该作者
配制0.1%明胶溶液必须用无菌的PBS配制。注意无菌操作。无菌准确称量0.1克(配成100ml溶液)(可以把天平拿到超净台先灭菌),充分摇匀,过夜放置,然后无菌分装,4℃保存。
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板凳
发表于 2010-5-17 18:26 |只看该作者
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回复 3# labby
7 c/ Y9 a. i. {! h# l% p2 _7 x7 l, M! ?, P# d
+ q; w+ J  M8 @, Y: V. A* o; t
    为什么说必须要用无菌的PBS配置啊?我0.1%的明胶就是使用洗胚胎的水配置的,效果很好的。( Y: p" `9 M7 S$ J% j
一般操作:
6 @" \1 Q% @3 _1、500ml 的洗胚胎的水
5 U3 H( `0 J& [2、加入0.5g的明胶) Y8 N9 V9 L3 ]7 S$ C. [$ w
3、56℃充分溶解6 f* n- C4 ~  P$ o3 g
4、0.22微米滤器过滤备用
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报纸
发表于 2010-5-17 18:27 |只看该作者
刚刚忘了说了,水和明胶都是用的sigma的

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地板
发表于 2010-5-17 19:18 |只看该作者
我们是先配制1%的明胶母液,然后用时再稀释到你所要的浓度,0.1%或其他的。我们是用双蒸水配制的。
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发表于 2010-5-17 21:57 |只看该作者
前天刚配。0。1%,DPBS,明胶粉。。60-65度溶解。。趁热过滤,分装4度保存。
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发表于 2010-5-17 22:45 |只看该作者
学习啦 学习啦

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发表于 2011-6-19 14:33 |只看该作者
回复 labby 的帖子# H" j7 a; ~8 {  V( z

3 E, Z! ], P( B1 H2 V8 x7 R我用PBS配制的明胶后,经过高压灭菌后,为甚么呈现浑浊样呢?还能用吗?
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发表于 2011-6-20 17:49 |只看该作者
用双蒸水配的2%明胶为什么不凝固?
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