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有利用非病毒的方法诱导成功iPS的没有? [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-12-20 20:29 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
有没有人利用非病毒的方法获得iPS了,如果有,分享一下经验,谢谢!
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沙发
发表于 2012-12-21 10:44 |只看该作者
当然有~! 有用相应转录因子的蛋白,诱导iPs也是可行的,只是没有病毒来得效率高。你可以找下相关文献。
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金话筒 优秀会员

藤椅
发表于 2012-12-21 11:06 |只看该作者
回复 birdflubirdflu 的帖子
' V# D+ K4 X+ G1 n' a1 J- g6 D4 o/ I% p/ V( A+ C
蛋白诱导很坑,建议试试可以,不要抱太大希望。
; r0 k' }& X& N, u' f; r据闻利用仙台病毒做的非整合诱导体系效果不错,life tec 好像有相应的试剂盒,不过可贵,你可以试一试。
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板凳
发表于 2012-12-22 16:04 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
Shinya Yamanaka 有篇 NATURE PROTOCOLS 的文章Generation of mouse-induced pluripotent stem cells with plasmid vectors, 不知道有没有按这个方法做出来的?
3 a% L; f; W$ `& W. U9 ?, h  y! F' a
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报纸
发表于 2012-12-26 14:09 |只看该作者
当然是episomal vector方法啦
% u& |6 T7 j) P山中伸弥在他的综述里面都推荐这个无病毒无基因整合的方法,就是目前的诱导效率比病毒介导低* J. \# i( X% z- e" x3 e& w

* U. Z3 B: L' Q9 z9 e$ B补充内容 (2012-12-26 14:12):
- }& L6 D2 p: f: t+ T1 W参考文献是美国汤姆森实验室的俞君英发表在science上的文章,引用次数很高。+ a$ Y: M3 W; O, V1 k
Human induced pluripotent stem cells free of vector and transgene sequences
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地板
发表于 2012-12-26 16:43 |只看该作者
回复 liuyul03 的帖子
; ]* e) U  P5 s
. H5 \" {3 q+ M% u您好!这个问题现在已经相对比较成熟了,一下几方面可以参考:8 n$ ]/ @5 {/ X8 h$ ^0 V1 P3 {
1、非病毒载体诱导:比如tet-on/off-PB载体,PB为转座子,然后将把载体通过电转染的方法可以成功获得ips
* H- ?: ]  H/ L2、重组蛋白诱导,此方法相对比较难,诱导效率低些( I5 c; e2 n% {2 S3 E! u
3、mRNA诱导,这个办法相对比较费钱,但是如果诱导好的话完全可以临床应用,整个过程可以不用雪清河feeder,极力推荐" r0 {: Y3 L; p( u" P1 o. K2 r
    还会有很多更好的办法可以解决这些问题的,很多学者不停地研究这些热点问题!
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金话筒 优秀会员

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发表于 2013-1-6 13:02 |只看该作者
我想LZ的意思是论坛里有没有人做出来,或者说重复出来吧,Protocol千千万万,关键是在自己的lab能做得出来呀。目前国内的实验室还基本都是用的病毒系统(如果没有提到贵实验室,抱歉了……)
9 e- @+ b+ [8 t9 v国外lab的系统很多时候搬回国内都不能很好的work,不是说国内怎么怎么不好,就拿个最基本条件来说吧,在上海空气质量都差,细胞房的培养条件怎么和国外比。
) N, q. z0 j: E) u当然老美发paper的时候也有不厚道的地方,数据太好看效率太高(这是跟咱们自己做的相比较),他们投出去没人去argue,但是同样的数据换成中国人投出去,就要被argue,说我们造假,这就是现实。4 X1 i. E. q( w# s: v- A
再插一句,之前Nature上那篇国人做的iPS成瘤问题的paper,发出来的时候,Yamanaka开年会的时候就很火大,说他们造假,可是文章现在都还在Nature上摆着,为啥呢,因为在老美那边做的。
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发表于 2013-1-7 12:53 |只看该作者
有篇用OCT4,SOX2,KLF4,C-MYC转录因子诱导FIBEROBLASTS 细胞到iPs你可以看以一下.
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