成骨诱导后期细胞总是脱落

lljy456

成骨诱导后期细胞总是脱落，在六孔板接种密度2*105每孔，70%换诱导液，大概14天左右细胞开始脱落，为啥啊？

baby00000003

长得太满了，从边缘卷起来了么？

smile微微笑笑

应该是密度大了，我当时接种的是24孔板，密度是3000个/well~~~

youlanjingling

我的也是，细胞从边上就卷起来了，反复尝试了好几次都不行

yangweirenhao

我也遇到了同样的问题，我们是半两" T/ F" g2 R3 i4 A
量换液，现在做法就是换液加液的时候非常缓慢，效果会好一点，然后有个问题是听人说染色的时候悬浮的钙结节要保留，不知各位是不是这么做的

yangweirenhao

我们是用12孔板，11000每孔种板量，80%左右满开始诱导

veda327

选用好一点的一次性耗材，可以先用合适浓度的明胶预处理；换液的时候培养基恢复到室温或者放到培养箱预热；操作细致一点；
9 P" |6 l7 F2 I' _# L+ K" ^2 I另外一开始的细胞密度要控制好，不能接种太密！

田甜

用过一个成骨诱导试剂盒套装，里面配了0.1%浓度的明胶。其说明书上注明，接种细胞之前先铺明胶，细胞接种量也告知了范围。所以你可以从这两个方面去解决脱落问题吧，，或是也直接购买试剂盒。