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# z1 D8 M" [1 ^/ I6 T4 X/ l; C$ S0 q
; |9 c" M( r" ~2 p9 i我们公司有个推荐的贴壁配方的方法可以供参考,也可以通过lifetechnologies.com/neuroprotocol/hnsc查看人神经干细胞培养的完整实验方案。
" {# @& K5 t/ Q: c$ H I目前我们正在对实验方案进行汉化,稍后会分享给大家。- Z& I0 k. _9 q& g- j
. X: G: _6 y. Z. N神经干细胞的传代 (贴壁培养)
' {/ t W7 i8 D6 L( m- i% E) w% S1. 吸弃培养基,用不含Ca2+和Mg2+的D-PBS清洗细胞。3 P9 b% P* i4 p. n
2. 将1 mL的TrypLE™ Express或StemPro® Accutase® 加入培养器皿中。
! q8 Z- h& P8 ~' v( j注:加入TrypLE™ Express或StemPro® Accutase® 30秒内,细胞单层即从培养皿中脱落。$ M. w0 O; Z# \+ v
3. 轻轻吹打变松的细胞单层,使其形成单细胞悬液。加入4 mL培养基,终止其消化作用。加入TrypLE™ Express或StemPro® Accutase®后,切勿处理细胞超过3分钟。, n% C" L5 B- ^6 [# K1 t
4. 细胞以1, 200 rpm离心4分钟。吸弃上清液。- u) e/ `+ n9 ]3 Q' D
5. 将细胞重悬于StemPro® NSC SFM完全培养基中。 h, h5 G! f7 }1 V, c; \
6. 采用血球计数器计数细胞。
9 H4 F9 x* P6 S1 s4 b7. 将以新鲜培养基稀释的细胞接种于CELLstart™ CTS™-或纤连蛋白包被的培养板中,密度为 1 × 104-1 × 105 个细胞/cm2,或者以1:4 的比例接种细胞。 |
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