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看了“肿瘤细胞株能用来培养出干细胞吗”一帖后想到好几个问题,本来想回帖,但是打出来发现有点长,很想探讨一下这个问题,干脆再开一贴。
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首先有一个不成熟的想法,如果普通癌细胞能在某种条件下转化为干细胞样细胞的话,是否可以采用:杀死干细胞+抑制普通癌细胞向干细胞系转化 这种原则来治疗?, q* T! @5 W) {" s
9 P- V2 x6 h; J2 p# ~" X3 o0 C另外,有关实验技术完美时,肿瘤细胞系任何一个单细胞都能在动物体内生成一个完美的肿瘤,这个我还真不确定。1 F x% T& a; G' J( s2 e- G8 V
这样的话,许多文献中提到的“动物体内的成瘤性是判断肿瘤干细胞的金标准”也就不再适用了,因为手术刚切下来的肿瘤,处理之后不分选直接原位移植,貌似也能成瘤(不确定)?8 U2 |1 F6 D4 I
* q8 V6 R' q7 M X9 C: p那么已建成的肿瘤细胞系和实体瘤标本的真正区别又在哪里呢?" M2 K1 K) I/ ?. o5 w
" L8 E' c7 Q. @( Y在肿瘤干细胞实验方面,我所了解的胶质母细胞瘤干细胞样细胞研究早期,当我们把CD133+作为筛选干细胞样细胞的“比较普遍承认”的标志的时候,
# m ^' ^" A6 n w0 C有人做了实验,1000个CD133+胶质瘤干细胞样细胞在裸鼠原位移植后能成瘤而100000个CD133-细胞则不能成瘤。9 X h& t. N6 d7 O
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但是后来又有人用CD133-也做出了原位成瘤的裸鼠,看来一方面是这个干性标志物还有待改进,另一方面也有可能普通细胞系和干细胞系确实能相互转化。
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& f1 N# g3 u- p/ K' }4 i0 y那怎么转化呢?就我所看过的文献,显然普遍认为干细胞系向普通瘤细胞系转变就是分化,也就是在无血清培养基里加血清诱导分化就可以了。+ j N) @! t6 R& k
此时的概念是干细胞系可以不均衡分裂,也就是干细胞可以无限增殖+分化,而瘤细胞只能有限增殖。此时的有限增殖(只能传有限代)我也不太确定了," `9 j+ |0 o# ^ o- F
因为可以买到的那些胶质瘤细胞系都是用普通含血清培养基代代相传的,那算不算无限增殖?5 W5 g1 s8 Q9 s+ U0 P! q) F: g
$ a+ v5 \% P1 Q' `/ z; L而普通瘤细胞系向干细胞系转化的方法,我真的没有看到谁专门就这个问题详细写过。目前仅仅知道所谓的无血清培养,
7 `. r& m8 \7 P# H [2 C3 Y& a包括sphere assay神经球悬浮培养严格来说仅仅能算作一个“富集”干细胞样细胞的过程,因为即便是严格的由一个干细胞克隆生长而成的一个神经球,3 ~" D- v5 `) n8 S7 @2 A% n
也有异质性。目前认为里面包含着干细胞样细胞,前体细胞,少部分已分化的普通瘤细胞。也就是说,. K# F1 @& C2 }' q7 t, F
仅仅能促使存在于整体中的极少量干细胞系在适当条件下(无血清+生长因子刺激培养)“脱颖而出”,而留下其他的“非永生的”普通瘤细胞逐渐在数代之后死亡。
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那么具体应该是几代?/ Z; P' `5 ]6 Z$ j5 \, k6 k
( A8 L# T$ u$ D& _" J有人认为是6代。我看了这个说法的参考文献,6 s. M& v' r* V/ Q+ K
一篇Harris MA, Yang H, Low BE, Mukherjee J, Guha A, Bronson RT, et al: Cancer stem cells are enriched in the side population cells in a mouse model of glioma. Cancer Res 68:10051-10059, 20087 Y6 A7 \5 ?; k0 v- ]3 ^
是无血清培养基+生长因子刺激下可以传25代。而后为了证明其含有干细胞,特别的又去掉生长因子再试一遍,可以传代,没说能传几代。
% u5 [; U( o: M0 J: j另一篇Louis SA, Rietze RL, Deleyrolle L, Wagey RE, Thomas TE, Eaves AC, et al: Enumeration of neural stem and progenitor cells in the neural colony-forming cell assay. Stem Cells 26:988-996, 20089 l; g% |2 o Y8 E
明确提到了能传6代以上的概念。也就是说,要做干细胞实验,最好选择传了6代以上还没死的细胞。
: a+ @* A: m4 @ ^8 ^但问题又出现了,基于干细胞样细胞的不均衡分裂性质,每一代干细胞都能产生新的普通瘤细胞。所以看来整个细胞群体的组成还是处在动态平衡的状态,不太可能通过传代的方法剔除普通瘤细胞。* E p) F( ]' `" `! e
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回到上一段中,又有一个问题,生长因子在干细胞无血清培养中具体都起了哪些作用?为什么最初开发这个方法的时候要用生长因子?体内的情况和加了生长因子的胞外环境都有哪些不同?
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我感觉自己在这方面很多想法还不成熟,所以抛砖引玉,想请大家也谈谈自己的看法,便于学习,谢谢。 |
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