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heiguzi1988

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楼主

发表于 2011-6-26 10:28 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

我已知这个基因的CDNA片段长只有700多，预测基因全长CDNA是1万的样子。可以以这700为基础，通过3'和5'race得到这全长的序列然后测通吗？

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沙发

发表于 2011-6-26 10:55 |只看该作者

说实话我没有看明白你的意思！前面的700cDNA是指什么？不包含内含子？1W又指什么？RACE只是帮组你确定基因的5‘转录起始位点和3’终止位点的，用RACE只能得到5‘端和3’端，而如何得到全长？如果要得到全长cDNA，那只需要用polydT反转录加PCR就可以得到全长cDNA，如果要测基因组上整个基因的片段，在cDNA的序列基础上设计引物做PCR就可以，如果太长的片段无法PCR，可以设计成段的引物做walking！