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楼主: Zhouhaiyan12388
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干细胞培养是不是要特殊培养基   [复制链接]

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发表于 2015-12-1 08:53 |只看该作者
维持的话,早期用feeder养时,用的KSR加bFGF;现在有更便捷的培养基,E8和mTSR1,后者更贵,一瓶500毫升2000多。B27和N2一般在进行分化protocol时才用。
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发表于 2016-1-13 23:17 |只看该作者
本帖最后由 liqiang8589 于 2016-1-13 23:18 编辑 + U" Y5 ?( V# W( t' ^

. K, U. k- @: l- G' V7 ?2% --- FBS
1 Y' Y& v1 e) V) b# l+ Q5 ng/mL --- rh FGF basic7 ]8 h% a. H+ J: I
5 ng/mL --- rh FGF acidic: S8 P* N  c2 L; z& l* d
5 ng/mL --- rh EGF
) r- }( I, w- U8 ?2.4 mM --- L-Alanyl-L-Glutamine* ]+ \- n/ B$ _* ]5 ~
---------------------------------------------0 P4 M6 X! _4 ~+ Y6 o, @8 x
+双抗
& r6 v+ o( V& d) ?: B这个是在ATCC网站上找到的---低血清人间充质干细胞培养液
1 [2 |% |) Y* G: L- A3 O2 z! C现在论文好像都都在用DMEM-low glucose培养液为基本培养液
+ X1 j9 L# B! `, e
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发表于 2016-1-19 14:58 |只看该作者
干细胞培养一般是DMEM等营养较全面的基础培养基,加一些相关细胞因子比如kGF,EGF,bFGF等。根据培养细胞类型添加血清。基础培养基+细胞因子+血清(+饲养层)+双抗。
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发表于 2016-5-12 15:22 |只看该作者
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可以参考文献或者专利,有的干细胞比较好养,基础培养基DMEM/F12加血清就好了,但是血清中的一些成分会导致细胞衰老或者分化,如果传的代数不多,基础培养基就可以满足培养要求。如果传代数多,或者对细胞质量或者数量要求比较高,就可以用专用干细胞培养基,那些培养基会要求加少量血清或者不加血清,对细胞分化影响比较小
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发表于 2016-8-26 19:21 |只看该作者
哇!感觉这个帮助很大!但还是没有弄明白是加血清还是不加 ?

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发表于 2016-11-17 14:27 |只看该作者
我们实验室用的是3 R! k5 k* j% S. t% u9 o( I
15%ksr
) A" k* p; D3 G. W2 i' w( y高糖DMEN
5 s( d! h3 V8 i/ V' t1%NEAA3 @, F9 Y8 i7 `: z  N, }+ i; {, a
1%Pruvate
, o& \+ P) \9 X  M' {" O% d5 a1%Glutamine
% Q/ W* {2 e7 M( O& K1%双抗
$ d, a* t, s1 W/ R( u" |, r1%FBS% ^& E' ~2 K* V4 p
0.1%LIF外加beta巯基乙醇
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发表于 2017-3-8 10:18 |只看该作者
这要看你要保持干细胞的全能性还是要分化成其它细胞了。7 X7 y, j0 Y* s2 P# j- h+ [
如果是iPS的话,如果是要保持全能性,好像普通高糖的DMEM就行,不过就是要每天换液。我们实验室用的是ajinomoto的ak02,可以保持很好的全能性。
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发表于 2017-4-24 08:55 |只看该作者
干细胞培养基一般加了一些特定的细胞因子,避免分化;一般多用无血清培养基,而且不同类型的干细胞所需培养基的类型也不相同
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