4型胶原酶可以用含血清（或KSR）的培养基配置吗？

sizhengliu

疑问如题！

jhu132llh

4型胶原酶有人说是只能逐步稀释，但也有人说可以用血清终止% T: x+ ?% c# z# U4 _
so。。。最好还是用不含血清的medium配置吧

lingminliang

用一般的基础培养基配就行了 用含血清的成本反倒高了 效果也不知道怎么样 如果实在想用的话可以做一个对照

evial

可以的，我以前就加过FBS一起消化，好像不影响消化效果。如果说血清和消化酶对冲的话，原理是液体中的钙离子会阻止消化酶，血清中的离子多一点，如果培养基中也含有钙离子呢那不是一样么？我觉得停止消化过程还是靠液体稀释原理。

yuanyan2010

回复 evial 的帖子6 G8 a( W2 I$ r. a
* b# z. w6 @' z
不是市售的胰酶消化终止的话要求有血清的吗

sizhengliu

回复 evial 的帖子8 y! [& L. Z9 p
- ~. S, G( \  e6 s
恩，谢谢你！我也查了，钙离子可以增强胶原酶的效果！

sizhengliu

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7 _! \9 h% y/ ~; R* t* ]; B. M* _5 q4 I1 L
胰酶是用血清中的钙镁离子终止消化的，换成含钙镁的PBS也是一样的。

evial

是的，钙离子激活消化酶的作用。这是消化酶啊不是胰酶！两者机制和停止机制不一样的啊！但问题是一旦激活如果新配新用那正好，但是时间一长不久衰退了么，那就效果差了呀，嘿嘿，所以说消化酶都是干粉，随用随配。
) o: ^  o& A' R做实验每样东西每个步骤都是学问，不是照本宣科就能运用自如的，

sizhengliu

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恩 说的有几分道理，谢谢！

huozhicb

大哥们，别讨论了！血清中有蛋白酶抑制剂，用含有FBS的培养基可以终止消化依靠的就是FBS中的蛋白酶抑制剂！KSR中成分比较清楚，没有蛋白酶抑制剂。一般消化用的酶直接用基础培养基配就好了，方便！