怎样培养无feeder的小鼠胚胎干细胞？

lindan666666

我们都在做小鼠ES细胞哦，在MEF上长满后传到经过0.1%明胶处理过的48孔板上，克隆形态很好哦，用的都是加了LIF的ES细胞培养液哦。你先0.1%明胶处理20分钟，ES细胞消化好后直接接种过去就可以啦，一定要加LIF防止分化哦

shangchunhua

回复 igdb 的帖子, q4 w3 D' P2 \& z5 D9 `' ?& u

  j) k1 Z! |! m7 }% }我指的是驯化的protocol，很多文章只是提了一下，都没有详细讲的。

lixf

我曾经养过无feeder的ES，先用明胶包被培养皿，再用加2i和lif ES培养基培养就可以了+ g8 R4 Y. L6 n3 N, V
但是在无feeder的环境下只能支持2代，传到第3代时候，就会有细胞分化现象。

jjjk127

同感呀，也想无feeder养，可是养不好呀，求高手指点5 p6 u- m6 t" ^% Z0 }

shangchunhua

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/ e0 j0 q2 \) k8 T; E! j+ j5 N3 J. V0 R% i
我分享一篇应其龙的文章吧

shangchunhua

回复 igdb 的帖子0 V. y* M; t% Y0 J) U% A: B. u
! L8 _8 r9 u) ~1 A
Millpore的一个驯化的protocol，不过要用专用的培养基

小猴子2421

您好，我可以问下您的2i/lif培养基配方吗？

细胞海洋

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splinkerette

回复 song58 的帖子6 g" N/ s6 @! g0 C; k- z- @/ V& g

# E, i' r: O1 W/ p# H" `1 ^- K; w我也用的R1，但是直接养在gelatin上，感觉形态不是很好。请问用的什么牌子的血清呢？个人觉得血清的影响很大