间充质干细胞的成骨分化培养的方法是什么？

lizzylively33

请问间充质干细胞的成骨分化培养的方法是什么？有什么要点及注意的地方？

tjbone

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1.        成骨：将hSMSCs低密度（100cells/cm2）种到六孔板上，在完全培养基中培养14天。在第七天，单个细胞形成的克隆已经可以用结晶紫着色。如果是向骨分化，则培养基要换为骨生成分化培养基——完全培养基中加入10-7M地塞米松、0.2 mM抗坏血酸维生素C和10 mM β-磷酸甘油。将细胞再培养21天，紧接着用2%茜素红（PH4.2）固定和着色。将细胞再培养14天，紧接着用4%多聚甲醛固定1小时，采用碱性磷酸酶染色观察。

lizzylively33

谢谢

wanglijing2011

回复 tjbone 的帖子" [" A' H' X) {- V; x( _; H
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你好，请问你用的2%茜素红（PH4.2）是如何配制的，可否指点一下，我参考别人的文献，用的是PH8.0  Tris-hcl配制的0.2％的茜素红染液，效果不怎么好。

沙漠狐o0

回复 tjbone 的帖子, `0 ~/ h3 P1 Q# I

! b) i8 d( ~* N4 o8 [) p- d请问为什么要以低密度接种呢?