脐血干细胞复苏现象请教

anzhida0823

脐血干细胞复苏时，融化时时一块一块像浮冰一样好呢 还是整个一块缓慢融化好呢  请各位大侠不吝赐教，谢谢！

jack1381818

1.首先需適用合容器儲存;袋式'管式/ G, J' R# e& q5 ]/ B) [8 C
2.解凍時應浸入液面下避免上下溫度不均: J2 y& l0 i/ _
3.融化时时一块一块或还是整个一块缓慢融化與細胞濃稀度及均勻性有關'j
' r$ d6 \' b1 R! T# {所以依據實驗去解凍只會有快慢差異影響活性'無法依好壞為判定依據' 以上說明9 W# T) }5 K/ P( g

呼吸

细胞复苏，要迅速，时间越短越好。掌握慢冻速溶。

anzhida0823

回复 jack1381818 的帖子8 s+ |, M- o0 F' z( ?1 i& _
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我们用的是50mL冻存袋，跟脐血库用的一样，解冻时我就发现自己动存的细胞融化的慢很多，一般需要3-4分钟，而脐血库的只需要2分钟就化开了，细胞数量在14-16*108左右，自己冻存的复苏后或率也比较低，有什么办法能提高均匀性呢？浓稀度在多大比较好呢？请指教，我没什么太多经验，谢谢！

anzhida0823

还有就是复苏时是带着铁盒子一块置于水浴中比较好还是去掉铁盒子比较好呢？我们现在是将铁盒子置于自封袋中一块儿置于水中，待铁盒子温度稍高点再去掉铁盒子不知道这样好不好？

jack1381818

复苏时去掉铁盒子比较好

deshenglll

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; P" I) c/ m3 x+ c/ D/ r3 k你们复苏的脐带血是什么样子的？我们做的脐带血复苏后没有明显的分成，离心也离不出单个核细胞。求解。

大少爷

复苏时，去掉铁盒子，将冻存袋外面用酒精擦拭后装入一个干净的塑料袋，置于40度水浴锅中，并不断轻轻摇晃塑料袋，加快细胞复苏。

jack1381818

脐带血复苏后没有明显的分成，离心也离不出单个核细胞。. v) @: ~1 W! m* K
建議: 1.解凍後的細胞懸浮液加入PBS以稀釋DMSO的毒性。再離心
6 u- U1 h6 _$ n          2.量太少而不足以稀釋DMSO的毒性及離心時分層。
! [$ |1 U/ J2 T# d/ E

细胞海洋

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