各种诱导iPS方法

懵懂干细胞

回复 hualin840518 的帖子1 I; `! X9 b$ J- G" c7 y6 j# b
- o% `3 C0 t/ a5 l% C
:D 呵呵！！！！！！！！

Damon-Salvatore

以病毒为载体的诱导方法效率相对较高，但是逆转录病毒和慢病毒产生的载体基因 会以很高的几率整合到宿主细胞基因组上造成插入突变，甚至将细胞诱导成癌细胞，大大影响了iPSC在组织工程与再生医学当中的应用前景。腺病毒虽然不会引起基因组整合，但是效率极低，限制这项技术在人iPSC的应用。

Damon-Salvatore

虽然目前基于DNA转染的一系列方法表面上是安全的，但是它们增加了基因组重组和插入突变的可能性，而且诱导效率普遍比较低。基于RNA的诱导方法可分为基于mRNA和miRNA，前者诱导效率相对较高，可是所需的mRNA获取难度太大，后者虽然所需miRNA较易获取，但是诱导效率相对前者低了很多。基于蛋白诱导的一些策略，虽然它彻底解决了外源基因与宿主细胞基因组整合而造成的突变问题，导入细胞后不久就被降解，不需要繁琐的实验操作进行外源基因沉默。但是这种方法需要多种特殊的化学处理，如丙戊酸处理等，使实验操作变得繁杂。而且，有活性的重组蛋白很难获得，想要得到纯度较高的这些蛋白难度更大。

Damon-Salvatore

iPSC诱导过程中，很重要的一步是使外源基因沉默。逆转录病毒载体携带的基因的沉默是细胞达到完全重编程状态的标志，在以逆转录病毒和慢病毒为载体的诱导技术中，需要组蛋白修饰，DNA甲基化等来沉默外源基因。在转座子技术中， Woltjen et al.证明了插入在被连入转座子中的2A序列之间的重编程因子被完全移除。（引用文章即附件）

Damon-Salvatore

' U% r' ~8 }5 H3 m9 u0 W+ D- J
表格中对应的引用文献：7 W( q, F5 @9 U0 E$ r
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% E& _1 q; c) a+ f$ w
* d0 n- Z9 u- q) }2 I' H: f
补充内容 (2013-5-19 11:10):% @. {. t* T% h. A1 f
表格自己做的，打算在小综述里用。
3 w: X% M3 z4 a& V& u5 s
, c3 z1 f0 m! h% D补充内容 (2013-5-19 11:10):1 A% Q" i& p" W3 A0 z0 @5 r
还请大家多多指点

cbjonathan

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8 L0 Q2 G4 `5 J) b- }& A6 R$ `1 G8 m9 a) r1 `% X8 @/ D7 y! w
仁兄提到：“逆转录病毒载体携带的基因的沉默是细胞达到完全重编程状态的标志”，请问有无相关研究的文献呢

Damon-Salvatore

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3 A  _) a6 R/ i! |  H7 w
3 Q, `5 f4 t# W4 b% P/ T5 ]原话在 文章abstract 划红线的句子。
+ z5 i  c) g/ {& {3 N* l% d, q& ^
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版主能不能加点威望啊  我还等着威望超过50，加干细胞之家的QQ群呢