求助~~肿瘤组织抗原的提取？？？

hwlightning

肿瘤组织抗原的提取方法？
' W- U% i' [$ [# }6 z浓度是怎么检测的？刺激DC需要加入的量是多少？

easternliu

七次方个细胞100ulPBS，液氮反复冻融4、5遍，加PBS，离心取上清

hwlightning

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* P! t- [3 [; t- n: f- O3 K
0 [2 Q( N9 j( M+ q5 R) w: w9 k4 L是用机械法取细胞还是酶消化法？刺激DC时加入多少量了？

easternliu

回复 hwlightning 的帖子, M" X  j1 z$ [' S1 y/ R; P# `8 {
8 u; D, m0 _2 Z0 `9 {  L( {$ l5 K
消化都可以的，完了用PBS洗两遍再重悬，加多少量我不记得了，貌似加的不多。你还是买肿瘤抗原吧，市场上有的卖。

hwlightning

回复 easternliu 的帖子+ Q5 L+ B4 q: O- |- S2 w) n
, i" b8 n% T+ C
多肽吗？贵不贵

kyo000

回复 easternliu 的帖子& w& u6 u; u* \  D" T$ U, u+ F
# ]) j* B2 S$ @( ]7 q
为什么我用消化法得到的细胞很少？用的是加EDTA的胰酶消化，消化完后直接过滤，PBS洗一遍重悬计数

easternliu

回复 hwlightning 的帖子9 W3 }% D; N5 o
- o8 X" h/ ]- I
嘎嘎，没买过。查了一下，是加1ml pbs离心然后加100ul就行了

easternliu

回复 kyo000 的帖子# \6 j& {4 s6 h: u7 X) I  I* U

/ @# m/ d2 B; I. _不知道你说啥。消化得的细胞少是啥意思。然后过滤是过滤什么。然后又计数。。。