求助~~肿瘤组织抗原的提取？？？

hwlightning

肿瘤组织抗原的提取方法？
: E, s3 P) t: s0 r9 ]" i浓度是怎么检测的？刺激DC需要加入的量是多少？

easternliu

七次方个细胞100ulPBS，液氮反复冻融4、5遍，加PBS，离心取上清

hwlightning

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) G% Z2 k: B1 h' B1 _  ^2 \
" r2 j9 D, H' S% q& Y! O是用机械法取细胞还是酶消化法？刺激DC时加入多少量了？

easternliu

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  D) G3 O1 {7 `& i
& x6 j8 e1 ]6 H消化都可以的，完了用PBS洗两遍再重悬，加多少量我不记得了，貌似加的不多。你还是买肿瘤抗原吧，市场上有的卖。

hwlightning

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; l2 \6 V- A8 L, m" C0 j多肽吗？贵不贵

kyo000

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# a3 x  R& M4 V6 l( k+ d/ v* c1 B
为什么我用消化法得到的细胞很少？用的是加EDTA的胰酶消化，消化完后直接过滤，PBS洗一遍重悬计数

easternliu

回复 hwlightning 的帖子. q% n% S, d% ]: E1 z2 g0 L. i9 _

7 q+ I# m5 j$ v/ B嘎嘎，没买过。查了一下，是加1ml pbs离心然后加100ul就行了

easternliu

回复 kyo000 的帖子, ~" b' p% d/ p/ L# r4 G
! U4 s" I# `/ ?( J
不知道你说啥。消化得的细胞少是啥意思。然后过滤是过滤什么。然后又计数。。。