小鼠ES怎样才能无Feeder培养

cochongg

JM8怎样能在，
7 _" _+ @' ?0 k. r, j  W有明胶无Feeder的板上，
; P$ t7 w* h- D' J3 T培养一到两代，
5 Y; g, s* X+ k. x" M5 b分化尽可能少。
' Q" ]- h9 ^$ Y6 f  H( e
! R. \; R# e; h" \) D. X培养基添加LIF的浓度要加大吗？求具体方法。

zpzp0312

应该可以

cochongg

回复 zpzp0312 的帖子* |. l- y! l/ d

# d2 y+ y; h' H* y9 V( s  ^我尝试过，去除Feeder之后，Es细胞第二天就出现分化，不能形成之前的克隆团

sisi48

尝试用2i （2 inhibitor）吧

cochongg

回复 sisi48 的帖子9 r9 F, y/ W2 H8 `2 ^

6 r; A8 V  I% R* v7 d; M  e7 T可否具体一点，，，，或者你是怎样做的，，，，提供一些数据参考

your1024

mark一下留个关注，也在考虑这个问题。

zpzp0312

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6 m3 D' ~- C4 `3 B: c( o  |8 ]4 Z  S. Q& y% `8 n3 H6 ]
我觉得可能是状态本身就不好( f0 r  j/ c- S# E' _' \
在饲养层上，分化的细胞不易观察到，所以去除饲养层后就明显很多了
( Z6 B* _9 }7 I, }另外可以考虑使用一些现有的可以在无饲养层条件培养的细胞系2 ~8 R2 `, {7 O! R" T
按说JM8里面应该有适合无饲养层培养的

cochongg

回复 zpzp0312 的帖子9 N! Y) l; _+ k& j. D$ U
* r8 o9 ]( [. K* w* s3 Z1 ]
转移到无Feeder之前JM8细胞状态很好，，，，因该说非常好，细胞团大小适中，边缘明亮，无重合。就是在无feeder的培养皿上，分化太严重。6 P+ n- o6 }! }/ t3 p! d: E

3 f( ?9 J9 c0 c8 Z: z另外补充一下：在无饲养层培养过程，连克隆团都形成不了。直接分化成纤维样细胞，贴壁，类似MSC

cochongg

回复 zpzp0312 的帖子- ~- P9 {5 `' S/ ?6 T! e
5 t# Y1 O$ E" K# t4 ?3 U
如果你有做过的，请提供一下适合无feeder的JM8类型，还有培养条件（培养基添加哪类因子，以及浓度等）

cochongg

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' B5 f, ?9 C9 b4 q( E) z$ J; X% z; J5 F9 H$ \6 H. k4 Y& F8 E; w
请问你有尝试做过吗？？